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近年研究發(fā)現人體絕大多數的惡性腫瘤細胞呈端粒酶陽性，而人體正常細胞卻為陰性，其中以神經母細胞瘤檢出陽性率為最高，提示端粒酶可作為神經母細胞瘤的檢測重要標志。本文綜述端粒酶在神經母細胞瘤的研究進展，并從端粒和端粒酶有關基礎知識著手探討它們在神經母細胞瘤的診斷和預后的作用，以及端粒酶抑制劑作為神經母細胞瘤的治療藥物的意義和前景。
一、端粒和端粒酶
端粒是真核生物線性染色體末端一種特殊的異質化結構，人和各種脊椎動物的端粒DNA序列都是（5`-TTACCC-3）n。對染色體末端限制性片斷TRFS的分析，能得到一個細胞群體端粒的平均長度，在人生殖細胞中為12～15Kpb。端粒給染色體末端提供了保護，防止染色體互相融合、重組以及一些外切酶、連接酶、DNA損傷等因子的作用［1.2］。
端粒還參與染色體在核內的定位以及基因的表達調控，跟細胞的壽命控制有著密切聯系。染色體末端的逐漸丟失會導致細胞最終退出周期。但是隨著細胞有絲分裂的進行。端粒長度會逐漸縮短，通過FRFS分析，發(fā)現正常細胞每年約丟失15～40bp的端粒序列，當端�？s短到一定程度，即不能維護染色體的穩(wěn)定，細胞最終死亡，故端粒的長度與細胞所能分裂的次數直接相關。端粒序列的正確性對其功能是必須的，端粒結合蛋白對于端粒的功能也極其重要，它們參與了端粒特定結構的形成，長度的調節(jié)及基因的表達［2.3］。
端粒長度的維持需要端粒酶的激活，端粒酶是一種核糖核蛋白復合體，它有別于一般的DNA聚合酶，是一種專一的逆轉錄酶，能以自身的RNA組分為模板從頭合成端粒以補償細胞分裂時染色體末端的縮短。從而有效地維持細胞分裂［3.4］。
正常人體細胞中沒有端粒酶的活力，而在腫瘤細胞中端粒酶卻特異性地表達，以維持惡性腫瘤細胞惡性生長。人類端粒酶的調控基因可能位于3號染色體，是一種抑癌基因［5］。
二、“端粒學說”和細胞永生化
端粒學說認為，在細胞有絲分裂過程中，伴隨著部分端粒序列丟失，端粒長度縮短，當端�？s短到一定長度，可能觸發(fā)某種信號，使細胞進入M1期，此時細胞不再分裂并出現老化。如果細胞被病毒轉化，或者某些抑癌基因如P53、RB等的突變，細胞越過M1期繼續(xù)分裂，端粒繼續(xù)縮短，最終將到達另一危機點M2，此時染色體出現各種異常形態(tài)，細胞中某些端粒由于太短而失去功能，于是細胞死亡。但有極少數細胞在此階段激活了端粒酶，端粒功能得以恢復，染色體形態(tài)得到穩(wěn)定，從而逃避M2危機，獲得永生化［6］�！岸肆W說”已為越來越多的研究結果所證明［7］。
三、端粒酶與神經母細胞瘤的相關研究
端粒酶與神經母細胞瘤的關系尤為人們關注。1997年Shay等［8］發(fā)現神經母細胞瘤94%呈端粒酶陽性。Hiyama發(fā)現神經節(jié)細胞瘤100%呈端粒酶陰性。從而提示端粒酶是神經母細胞瘤重要的腫瘤標志物，可鑒別良惡性腫瘤，輔助神經母細胞瘤的早期診斷。臨床上也發(fā)現端粒酶的活力與神經母細胞瘤病灶大小、惡性程度及手術后情況有關。Yokoyama等［9］發(fā)現末經任何治療的神經母細胞瘤76例，其中16例端粒酶高表達，預后較差，60例端粒酶低表達，預后較好。
端粒酶的激活究竟是在腫瘤發(fā)生的哪個階段，現在不十分清楚，通過對TRFS的分析，大部分神經母細胞瘤的端粒都較短，說明神經母細胞瘤細胞經歷了比一般細胞更多的有絲分裂次數，端粒酶陽性率隨神經母細胞瘤的發(fā)展過程而升高。臨床上也發(fā)現后期神經母細胞瘤的端粒酶陽性率高于早期腫瘤細胞，說明端粒酶的激活可在神經母細胞瘤的后期。特殊Ⅳ期的神經母細胞瘤恰恰是神經母細胞瘤的后期，但它的自愈性較高。經檢測及動態(tài)觀察端粒酶的活性，未發(fā)現端粒酶的激活。從而提示端粒酶的失活是神經母細胞瘤自然消退的重要機制。端粒酶的激活與某些抑癌基因如P53、Rb突變有關，提示端粒酶和P53、Rb聯合監(jiān)測可提高預后判斷的準確性。綜合以上結果可看出，端粒酶對神經母細胞瘤早期診斷、鑒別良惡性、判斷預后、指導治療有重要作用［9］。
四、端粒酶與神經母細胞瘤的治療
既然端粒酶與神經母細胞瘤密切相關，與神經母細胞瘤的預后密切相關，為神經母細胞瘤無限增殖所必需，為此 人們提出了三種策略治療神經母細胞瘤：①端粒酶抑制劑，已有報道［10］利用一些已知的逆轉錄酶抑制劑，如ddG、A2T等導致神經母細胞瘤端粒的縮短；② 端粒酶組分的抑制藥物，端粒酶蛋白組分是維持端粒酶結構功能所必需的物質，抑制此類蛋白合成導致端粒酶失效［11］；③ 基因治療是目前最為看好的治療手段，主要通過設計各種方案消除引起細胞惡性轉化的端粒酶基因的表達［12］。端粒酶與腫瘤細胞的分化有關，端粒酶失活將誘導細胞分化，神經母細胞瘤分化成熟為神經節(jié)細胞瘤，可能與端粒酶失活有關，從而開創(chuàng)了誘導神經母細胞瘤分化治療的新紀元［13，14］。
五、展望
端粒酶已成為當今最引人注目的腫瘤研究新領域，它與神經母細胞瘤的研究越來越深入，它的研究對神經母細胞瘤診斷，特別是預后判斷有著不可估量的作用。但是迄今為止還沒有分離到端粒酶的蛋白組分，且端粒酶在正常生殖細胞是合理存在的，應用端粒酶抑制劑和基因治療是否會帶來不利影響仍須進一步研究［15］。相信不久的將來，隨著對端粒酶動力學、端粒酶的分子結構及功能、端粒酶的調控基因和調控機制的研究深入，將對神經母細胞瘤的診斷及治療產生重大影響，最終為攻克根治神經母細胞瘤奠定基礎。
參考文獻
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