一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
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公開(公告)號
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CN1676600A
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公開(公告)日
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2005.10.05
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申請(專利)號
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CN200510023674.4
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申請日期
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2005.01.28
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專利名稱
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一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
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主分類號
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C12N1/21
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分類號
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C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;C12N15/62;C12P21/02
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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華東師范大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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賴玉平;吳自榮;黃靜;王林發(fā);左翼;李駿
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地址
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200062上海市中山北路3663號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海德昭專利事務(wù)所
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代理人
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程宗德;石昭
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌，其特征在于，該基因工程菌是攜帶重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重組質(zhì)粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD-1L基因的質(zhì)粒pET32a(+)。
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摘要
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一種高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。該基因工程菌是攜帶重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重組質(zhì)粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD-1L基因的質(zhì)粒pET32a(+)。該基因工程菌的構(gòu)建：根據(jù)DCD-1L的氨基酸組成，以引物的形式合成DCD-1L的兩條DNA鏈，兩條鏈之間有26bp互補(bǔ)，通過PCR擴(kuò)增獲得DCD-1L雙鏈DNA，經(jīng)酶切，插入質(zhì)粒pET-32a(+)，構(gòu)建成重組質(zhì)粒pET-32a-DCD-1L，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，獲得高效表達(dá)重組人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生產(chǎn)人汗腺抗菌肽的方法包括三個步驟：液體培養(yǎng)；純化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白；和制備重組人汗腺抗菌肽。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：生產(chǎn)重組人汗腺抗菌肽成本低；人汗腺抗菌肽的表達(dá)量高；純化步驟簡便，易于操作；得率高。
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國際公布
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