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重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子突變體及其制備方法

公開(公告)號 CN1687413A  
公開(公告)日 2005.10.26  
申請(專利)號 CN200510066193.1  
申請日期 2005.04.21  
專利名稱 重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子突變體及其制備方法  
主分類號 C12N15/12  
分類號 C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/435  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 梁亮勝  
發(fā)明(設(shè)計)人 朱俊銘;雷繼軍;李清雄;王革非;余永恒;張曉林;張光勛;文 力  
地址 430019湖北省武漢江岸區(qū)黃浦大街絲寶國際大廈  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 劉繼富;顧晉偉  
國省代碼 湖北;42  
主權(quán)項 一種制備hCNTF突變體的方法,包括下列步驟:(a)將hCNTF突變體基因序列克隆入表達載體以得到重組載體,并導(dǎo)入大腸桿菌中,生成含有重組載體的基因工程菌;(b)培養(yǎng)基因工程菌至OD600=12~14時,加入乳糖,誘導(dǎo)hCNTF突變體在基因工程菌中可溶性表達;(c)誘導(dǎo)后,向培養(yǎng)液中緩慢加入葡萄糖作為主要碳源,并控制培養(yǎng)液中溶解值為10%~15%,繼續(xù)培養(yǎng);(d)待基因工程菌的OD600=20-30時,收獲菌體,并將菌體破碎得到破菌液;(e)純化破菌液,得到純化產(chǎn)品。  
摘要 本發(fā)明涉及重組蛋白和其制備方法,具體涉及重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(簡稱hCNTF)突變體及其制備方法,更具體的說,本發(fā)明涉及用乳糖誘導(dǎo)hCNTF突變體在大腸桿菌BL21(DE3)中高效可溶表達、并從中加以分離純化的方法,以及通過該方法制備的hCNTF突變體。  
國際公布  
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