| 公開(公告)號 | CN1683014A |
| 公開(公告)日 | 2005.10.19 |
| 申請(專利)號 | CN200510016268.5 |
| 申請日期 | 2005.03.07 |
| 專利名稱 | 用于基因治療的樹枝狀聚賴氨酸衍生物載體的制備方法 |
| 主分類號 | A61K47/34 |
| 分類號 | A61K47/34;A61K48/00;C08G69/10 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 天津大學 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 史清洪;郝?lián)]紅;董曉燕;白姝;孫彥 |
| 地址 | 300072天津市衛(wèi)津路92號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 天津市學苑有限責任專利代理事務(wù)所 |
| 代理人 | 任延 |
| 國省代碼 | 天津;12 |
| 主權(quán)項 | 一種用于基因治療的樹枝狀聚賴氨酸衍生物載體的制備方法，其特征在于包括以下過程，(1)用體積比為25～80％哌啶/二氯甲烷溶液與修飾密度為0.02～4.0mmol/g的芴甲氧羰基氨基酸的4-羥基甲基苯氧甲基聚苯乙烯樹脂在4～40℃下反應(yīng)5～120分鐘脫去芴甲氧羰基保護基團，然后用二氯甲烷和乙醇洗滌至中性；(2)將脫保護的修飾氨基酸的4-羥基甲基苯氧甲基聚苯乙烯樹脂加入到按每克樹脂加入下述物質(zhì)量：0.1～12mmolNα，Nε-雙芴甲氧羰基賴氨酸、0.4～20ml二甲基甲酰胺和10～530mgN-羥基苯并三唑混合溶液中，然后再加入0.1～5ml1，3-二異丙基碳二亞胺，在4-40℃反應(yīng)2-96小時后用二氯甲烷、乙醇洗滌得到含一代聚賴氨酸的樹脂；然后將含一代聚賴氨酸的樹脂加入到重新配制的上述反應(yīng)液中合成含有二代聚賴氨酸的樹脂，其中Nα，Nε-雙芴甲氧羰基賴氨酸用量為每克樹脂0.2～25mmol；反應(yīng)得到的含有二代聚賴氨酸的樹脂經(jīng)二氯甲烷、乙醇洗滌后加入到新配制的反應(yīng)液中合成含有三代聚賴氨酸的樹脂，其中Nα，Nε-雙芴甲氧羰基賴氨酸用量為每克樹脂0.3～50mmol；(3)用體積比為25～80％哌啶/二氯甲烷溶液與芴甲氧羰基團保護的三代聚賴氨酸樹脂在4～40℃下反應(yīng)5～120分鐘脫去芴甲氧羰基保護基團，然后用二氯甲烷和乙醇洗滌至中性；將脫保護的樹脂加入到按每克樹脂加入下述物質(zhì)量：0.4～40mmol含羧基的化合物、1～20ml二甲基甲酰胺和50～530mgN-羥基苯并三唑混合溶液中，然后再加入0.3～6ml1，3-二異丙基碳二亞胺，在4～40℃下反應(yīng)2-120小時；(4)體積比為0.5-5的三氟乙酸/二氯甲烷溶液與脫保護后的樹脂在4～40℃下反應(yīng)10-180min；(5)最后用二氯甲烷溶液沖洗樹脂若干次，歸并濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至體積不再變化后加入大量無水乙醚并離心收集，所得到沉淀即為產(chǎn)物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種合成樹枝狀多聚賴氨酸衍生物的制備方法，采用修飾芴甲氧羰基氨基酸的4-羥基甲基苯氧甲基聚苯乙烯樹脂為固相合成介質(zhì)，與Nα，Nε-雙芴甲氧羰基賴氨酸發(fā)生步進式重復縮合反應(yīng)，生成的含有芴甲氧羰基保護基團的三代樹枝狀聚賴氨酸，其與含羧基的化合物進一步反應(yīng)制得含保護基團的多聚賴氨酸衍生物樹脂依次經(jīng)哌啶/二氯甲烷脫保護和三氟乙酸裂解方法將多聚賴氨酸衍生物從樹脂上切下，再經(jīng)無水乙醚沉淀出單側(cè)支化的多聚賴氨酸衍生物。以上述方法制備的、通過表層分枝單元的化學修飾制備的聚合物載體分子的單一性更高，且具有較好的生物相容性，其在基因治療過程中可作為運載核酸物質(zhì)的載體，也可作為抗原、診斷造影劑的載體加以應(yīng)用。 |
| 國際公布 |
