方法名稱: |
辣椒風(fēng)濕軟膏—總辣椒堿—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于辣椒風(fēng)濕軟膏中宗辣椒堿含量的測定 |
方法原理: |
本品加人甲醇提取,經(jīng)液相色譜分離,在280 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 Agilent1100型自動進(jìn)樣液相色譜儀,在線脫氣機(jī),四元泵試劑 色譜條件 色譜柱:ZorbaxC18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:甲醇-2.5 %乙酸溶液(60∶40);流速:2.0 mL/min;柱溫:30 ℃;檢驗(yàn)波長:280 nm;進(jìn)樣量:20 μL |
試樣制備: |
對照品溶液制備 取辣椒堿對照品約10 mg,精密稱定,置25 mL量瓶中,加甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻,精密量取10 mL,置100 mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻即得。 供試品溶液制備 取辣椒風(fēng)濕軟青供試品約4 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,加人30 mL甲醇,在50一60℃水浴中溫?zé)崾谷芙,轉(zhuǎn)入50 mL量瓶中,用甲醇少量分次洗滌錐形瓶,將洗液并人量瓶中,冷至室溫,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,于60 ℃水浴中保溫30 min,再于冰浴中冷卻,放置至室溫,濾過,取續(xù)濾液即得辣椒風(fēng)濕軟膏供試品溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取辣椒堿對照液以及辣椒風(fēng)濕軟膏供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算總辣椒堿含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
毛慶,張小松,何華.反向高效液相色譜法測定辣椒風(fēng)濕軟膏中總辣椒堿含量.藥物鑒定. 2007.16(8): 36 |