1.5 電導，射頻法
與早期的三分類血液分析儀利用庫爾特原理不同的是，它在內(nèi)外電極上加了一個RF射頻發(fā)生器。RF是射頻電流的簡稱.它是一種高頻交流變化電磁波。按照工作頻率的不同，RF可以分為低頻(LF)、高頻(HF)、超高頻(UHF)和微波等不同種類.不同頻段的RF工作原理不同， 和HF頻段一般采用電磁耦合原理，而UHF及微波頻段的RF一般采用電磁反射原理。在血液分析儀中多采用高頻電磁波，其原理是交變電流通過導體時，會在導體周圍形成交變電磁場，形成電磁波。因導體的密度及導電性質等差異，其周圍所形成的電磁場也不相同。因此當射頻電流穿透細胞膜透入胞內(nèi)時，由于核的大小、化學組分、顆粒多少以及漿核比例的不同，使RF信號發(fā)生不同的變化。借此可以將體積大小相同但內(nèi)部結構不同的細胞區(qū)分開來，如淋巴細胞與嗜堿性細胞。
1.6 熒光法
利用不同細胞的細胞膜、胞內(nèi)因子以及胞內(nèi)DNA、RNA、胞內(nèi)離子鈣等不同染色特性，選用具有特異性抗原或抗體的熒光染料載體，使待分離的細胞分別標記相應的熒光物質，經(jīng)過特定波長的激光照射激發(fā)出不同波長的熒光，利用各種PMT管檢測熒光信號的個數(shù)，可以完成待檢細胞的計數(shù) 如進一步分析計數(shù)淋巴細胞或網(wǎng)織紅細胞等
2 血細胞五分類技術的應用及展望
2.1 五分類血液分析儀的現(xiàn)狀
全自動五分類血細胞分析儀是多學科相互交叉、滲透、綜合的產(chǎn)物，涉及技術領域包括電子技術、計算機技術、傳感器技術、信號處理技術、生物化學、臨床醫(yī)學、精密機械、光學、自動控制、流體力學等領域。絕大多數(shù)“五分類”分析儀采用了流式細胞分析方法，而聯(lián)合檢測法則代表了五分類血細胞分析儀的最新發(fā)展趨勢。
BECKMAN COULTRER GENS全自動五分類血球分析儀采用其獨特的VCS技術，其中V(體積法)用于分析細胞體積；C(電導法)用于分析細胞核型；S(散射法)則用于分析細胞的顆粒特性。測試時。患者標本經(jīng)過分血片等樣本分配系統(tǒng)進入攪拌杯中，再加入溶血劑攪拌.溶血.完全破壞紅細胞，剩下的白細胞在樣本壓力作用下進入流式通道。運用VCS聯(lián)合檢測方法，在流式通道的某一位點。對通過的單列白細胞，進行逐個的、同時的、三重的檢測以及三維分析，以確定其亞群性質。
雅培公司新推出的CELL-DYN Ruby全自動血液分析儀運用合并流式細胞術及多角度偏振散射分離技術檢測白細胞。其采用多角度偏振散射技術對白細胞進行區(qū)分和按序分離，通過四個角度的光學檢測進行白細胞分析。其中，0度用于區(qū)分細胞體積大��；10度用于區(qū)分細胞的復雜性；90度用于區(qū)分細胞核的分葉性；90度D用于區(qū)分細胞的顆粒性。通過90度偏振和90度去偏振區(qū)分嗜酸性粒細胞和嗜中性粒細胞， 同時通過多個散點圖分析來鑒別和分類未成熟細胞和干擾物質。
拜爾公司的ADV IA120利用化學特性中過氧化物酶活性與激光散射技術結合原理進行白細胞五分類測定。該儀器有4個測量通道：血紅蛋白測量通道、紅細胞／血小板測量通道、嗜堿性粒細胞測量通道、過氧化物酶測量(白細胞分類)通道。其利用五種白細胞過氧化物酶活性的差異對白細胞進行染色.測定其酶反應強度，對自細胞進行分析。在測試過程中.每個細胞產(chǎn)生2個信號：組化染色結果與光散射結果。www.med126.com以X軸代表吸光率(組化染色酶反應強度)，Y 軸代表光散射(細胞大小)，一起定位于細胞圖上(cytogram)。計算機系統(tǒng)對存儲資料進行分析處理，并結合嗜堿性或分葉細胞通道結果計算出白細胞總數(shù)及分類。值得一提的是，該設備對RBC及PLT的測定也摒棄了傳統(tǒng)的阻抗法，而是采用激光法對其進行測定的。
希森美康(SYSMEX)公司五分類血液分析儀的檢測原理按生產(chǎn)時間的先后可分為三大類：多通道阻抗與射頻聯(lián)合檢測技術.代表機型有SE一9000；激光流式細胞檢測結合細胞組化染色技術，代表機型有SF一3000；激光流式細胞檢測結合核酸熒光染色技術，代表機型有SF一2l00。
