復(fù)方丹參注射液的質(zhì)量考核研究

摘　要　復(fù)方丹參注射液為臨床常用藥物，生產(chǎn)廠家眾多。由于歷版藥典均未制定含量測(cè)定方法，因此有

必要對(duì)市售的復(fù)方丹參注射液的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行考核。目前，部頒標(biāo)準(zhǔn)(WS3—B—3289—98)和國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道

的控制本品含量的監(jiān)控成分主要是原兒茶醛。本品主藥丹參的有效成分為脂溶性的二萜醌類和水溶性的酚

酸類成分，二者均具有心血管方面的藥理作用。由于注射劑中丹參以水提醇沉淀法提取制備，與以水醇提

取制備的復(fù)方丹參口服制劑比較，其主要成分以水溶性成分為主。由于，近年來研究表明水溶性成分丹參

素的擴(kuò)張心腦血管，抗血小板聚集，清除氧自由基等作用較二萜醌類的丹參酮更強(qiáng)，且水镕性成分是抗心

肌缺血的主要成分�？紤]藥典2000版中，以水溶性成分為主的復(fù)方丹參滴九的含量控制是丹參素，因此，

本試驗(yàn)同時(shí)對(duì)丹參素和原兒茶醛進(jìn)行了考察�？紤]近年來中藥注射劑的致藥原性疾病不斷上升，在IK6床

使用中也觀察到與藥物質(zhì)量相關(guān)的ADE，這可能與中藥制劑的成分復(fù)雜、因制劑工藝等原因造成雜質(zhì)限度

超標(biāo)有關(guān)，因此，同時(shí)作了注射劑相關(guān)物質(zhì)檢查。

　　含量測(cè)定采用HPLC方法，建立同時(shí)測(cè)定丹參素、原兒茶醛的色譜條件，方法的線性關(guān)系的相關(guān)系數(shù)分

別為0.9997和0.9995；精密度試驗(yàn)RSD分別為：1.56％(n＝6)和2.33％(n＝6)。加樣回收率平均值分別為

99.69％和98.54％。本試驗(yàn)考核了三個(gè)廠家八個(gè)批號(hào)的樣品，對(duì)測(cè)定結(jié)果分別進(jìn)行了單因素方差分析，結(jié)

果顯示：丹參素和原兒茶醛的含量均有非常顯著性的差異(P＜0，01)。對(duì)C廠家的四個(gè)批號(hào)進(jìn)行單因素方

差分析，結(jié)果也顯示有非常顯著性的差異(P＜0.01)。原兒茶醛的含量部按頒標(biāo)準(zhǔn)(WS3—B—3289—98)(不

得少于0.17mg／m)，八個(gè)樣品中有三個(gè)低于標(biāo)準(zhǔn)，其余均高于標(biāo)準(zhǔn)。不考慮970633批號(hào)的樣品，含量

(mg.ml-1)最高與最低值比：丹參素為2.07，原兒茶醛為4.64，相差較多，如果按臨床常用劑量18—20m1

／次計(jì)算，實(shí)際給藥量會(huì)有更大的差異，勢(shì)必將影響臨床療效。因此，應(yīng)該加強(qiáng)中藥復(fù)方制劑的質(zhì)控方法

研究。

　　按藥典2000版進(jìn)行注射劑相關(guān)物質(zhì)檢查，結(jié)果顯示：鞣酸項(xiàng)存在較大的問題，八個(gè)樣品中有6個(gè)不達(dá)

標(biāo)，其次為蛋白質(zhì)，有一個(gè)樣品不達(dá)標(biāo)。中藥注射劑中的這些相關(guān)物質(zhì)，是導(dǎo)致臨床使用中出現(xiàn)藥物不良

反應(yīng)的一個(gè)不可忽視的原因，因此，應(yīng)該加強(qiáng)中藥注射劑的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞　復(fù)方丹參注射液　質(zhì)量考核　HPLC

　　復(fù)方丹參注射液為臨床常用藥物，生產(chǎn)廠家眾多。由于歷版藥典均未制定含量測(cè)定方法，因此有必要

對(duì)市售的復(fù)方丹參注射液的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行考核。目前，部頒標(biāo)準(zhǔn)(WS3-B-3289-98)和國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道的控制

本品含量的監(jiān)控成分主要是原兒茶醛，考慮藥典2000版中，以水溶性成分為主的復(fù)方丹參滴丸的含量控制

是丹參素，我們制定了考察本品中丹參素和原兒茶醛含量的考核方法，同時(shí)作了注射劑相關(guān)物質(zhì)檢查，現(xiàn)

將結(jié)果報(bào)告如下。

1　考核樣品來源　北京市藥學(xué)會(huì)提供的上市藥品質(zhì)量考核品種和本原使用的品種，三個(gè)廠家八個(gè)品種。

規(guī)格有2ml和5m1。

2　儀器設(shè)備和試劑
2.1　儀器　HPll00高效液相色譜儀：G1311A四元泵，G1322A在線脫氣機(jī)，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，G1316A柱

溫箱，G1314A可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，HPCHEM色譜工作站。TCQ250超聲波清洗器(北京醫(yī)療設(shè)備二廠)
2.2　試藥　化學(xué)對(duì)照品；原兒茶醛(中國藥品生物制品機(jī)檢定所)；丹參素(天津天士力制藥集團(tuán)有限公司

提供)；甲醇、乙氰為色譜試劑，其余試劑均未分析純。

3　方法與結(jié)果
3.1　色譜條件色譜柱：HypersilODS柱(250×4.0mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇：乙氰：1％冰醋酸(含0.04％

IPRB7試劑)為10：2：88；流速：1.0ml／min；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫：40℃。在此條件下丹參素、原兒

茶醛完全分離，且峰型穩(wěn)定。
3.2　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備　分別取丹參素鈉和原兒茶醛對(duì)照品適量，精密稱取，加甲醇溶解并稀釋制成濃度為

每1mI含丹參素和原兒茶醛分別為140μg和48μg的對(duì)照品溶液II。精密吸取對(duì)照品溶液II加甲醇稀釋，制

成濃度分別為丹參素7，14，28，56，112，140μg／ml，原兒茶醛為2.4，4，8，9.6，19.2，38.4，48.0

μg／m1的標(biāo)準(zhǔn)品，置自動(dòng)樣器，　自動(dòng)進(jìn)樣10μ1，進(jìn)行色譜分析，以峰面積y對(duì)進(jìn)樣濃度C(μg／m1)回

歸，求得回歸方程，線性關(guān)系良好，見表1。

表1　標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果

成分	線性范圍(μg／m1)	回歸方程(n=6)	r
丹參素	0.07-1.40	Y=0.711C-1.861	0.9997
原兒茶醛	0.024-0.48	Y=5.011C-3.944	0.9995

3.3　供試品制備及測(cè)定取供試注射液2m1，于50m1棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。置自動(dòng)樣器，自動(dòng)進(jìn)樣10μl，測(cè)定丹參素和原兒茶醛，結(jié)果見表2。
3.4       照藥典2000版進(jìn)行注射劑相關(guān)物質(zhì)檢查，結(jié)果見表。

表2　復(fù)方丹參注射液含量測(cè)定結(jié)果[含量mg／m1，x±SD，n＝3]

廠家　 批號(hào)		注射劑相關(guān)物質(zhì)檢查　　　　　含量測(cè)定
		蛋白質(zhì)　鞣酸　樹脂　草酸鹽 　丹參素　　　原兒茶醛
A	981214	-	++	-	-	2.35±0.04	0.482±0.003
B	980438	-	+++	-	-	3.07±0.03	0.462±0.009
B	970632	-	+++	-	-	2.14±0.01	0.567±0.004
B	970633	-	++++	-	-	0.37±0.02	0.091±0.001
C	990404	-	++	-	-	3.63±0.01	0.384±0.002
C	990615	-	-	-	-	3.11±0.03	0.156±0.002
C	990605	+	+	-	-	2.69±0.02	0.298±0.001
C	990606	-	-	-	-	4.44±0.03	0.122±0.002

3.5　精密度試驗(yàn)　取一供試注射液按4.4.3項(xiàng)制備供試品，置自動(dòng)進(jìn)樣器中并依法重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果丹參素和原兒茶醛含量的RSD分別為：1.56％(n＝6)和2.33％(n＝6)。
3.6　回收率試驗(yàn)取含量測(cè)定后一供試注射液溶液lml，三份，分別加入對(duì)照液H適量得三個(gè)供試品，進(jìn)樣測(cè)定丹參素和原兒茶醛，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表3。

表3　回收率試驗(yàn)結(jié)果

成分	空白含量 μg	對(duì)照品加入量 μg	測(cè)得總量 μg	回收率 ％	平均回收率 ％	RSD ％
丹參素	0.1558	0.8400	0.9877	99.04	99.6g	0.89
	0.1558	1.0500	1.1908	99.34
	0.1558	1.2600	1.4248	100.71
原兒茶醛	0.3660	0.2880	0.3268	100.76	98.54	2.06
	0.3660	0.3600	0.3897	98.08
	0.3660	0.4520	0.4770	96.77

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