復(fù)方丹參片的質(zhì)量考核研究

摘　要　復(fù)方丹參片為臨床常用藥物，生產(chǎn)廠家眾多。本品的主藥丹參的有效成分為脂溶性的二萜醌類和水溶性的酚酸類成分，均具有心血管方面的藥理作用，近年來研究表明水镕性成分丹參素的擴(kuò)張心腦血管，抗血小板聚集，清除氧自由基等作用較二萜醌類的丹參酮更強(qiáng)，且水溶性成分是抗心肌缺血的主要成分。由于在藥典2000版之前，均未制定含量測(cè)定方法，因此對(duì)市售的復(fù)方丹參片的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行考核是有必要的。目前，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道的本品含量的監(jiān)控成分有總丹參酮、丹參酮ⅡA、原兒茶醛等。在藥典2000版中，本品含量控制的是丹參酮ⅡA，而與本品處方一致，功能與主治也一致的復(fù)方丹參滴丸，含量控制的是丹參素，綜合上述情況，在上市藥品質(zhì)量考核研究中，我們對(duì)本品主成分丹參中的丹參酮I、丹參酮ⅡA、丹參素、原兒茶醛含量分別進(jìn)行了考核。

　　含量測(cè)定采用HPIC方法，分別建立了測(cè)定脂溶性的丹參酮I、丹參酮ⅡA和水溶性的丹參素、原兒茶醛的色譜條件，方法的線性關(guān)系的相關(guān)系數(shù)分別為0．9998，0．9999，0．9997和0．9995；精密度試驗(yàn)RSD分別為1．66％(n＝6)，1．25％(n＝6)，1．19％(n＝6)和2．31％(n＝6)，加樣回收率平均值分別為101．69％，99．40％，9g．91％和99．39％。本試驗(yàn)考核了三個(gè)廠家四個(gè)樣品，對(duì)測(cè)定結(jié)果分別進(jìn)行了單因素方差分析，結(jié)果顯示：四種樣品的丹參酮I、丹參酮ⅡA、丹參素的含量有非常顯著性的差異(P＜0．01＝，原兒茶醛的含量無顯著性差異(P＞0．05)。且丹參酮ⅡA的含量均未達(dá)到藥典2000版規(guī)定(不得少于0，20mg／片)，低的僅為36．4％，高的為82．80％，相差較大。復(fù)方制劑中各有效成分的含量差異較大，勢(shì)必將影響臨床療效，因此，應(yīng)該加強(qiáng)中藥復(fù)方制劑的質(zhì)控方法研究。

關(guān)鍵詞　復(fù)方丹參片　質(zhì)量考核　HPLC

　　復(fù)方丹參片為臨床常用藥物，生產(chǎn)廠家眾多。由于在藥典2000版之前，均未制定含量測(cè)定方法，因此對(duì)市售的復(fù)方丹參片的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行考核是有必要的。目前，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道的控制本品含量的監(jiān)控成分有總丹參酮、丹參酮B A、原兒茶醛等，在藥典2000版中，本品含量控制的是丹參酮ⅡA，而與本品處方一致，功能與主治一致的復(fù)方丹參滴丸，含量控制的是丹參素，綜合上述情況，在上市藥品質(zhì)量考核研究中，我們對(duì)本品主成分丹參中的丹參酮I、丹參酮ⅡA、丹參素、原兒茶醛含量分別進(jìn)行了考核�，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1　考核樣品來源：北京市藥學(xué)會(huì)提供的上市藥品質(zhì)量考核品種，三個(gè)廠家四個(gè)品種。

2　儀器設(shè)備和試劑

2．1　儀器　HPll00高效液相色譜儀：G1311A四元泵，G1322A在線脫氣體，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，G1316A柱溫箱，G1314A可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，HPCHEM色譜工作站。TCQ250超聲波清洗器(北京醫(yī)療設(shè)備二廠)

2．2　試藥　化學(xué)對(duì)照品：丹參酮I，丹參酮ⅡA，原兒茶醛(中國(guó)藥品生物制品機(jī)檢定所)；丹參素(天津天土力制藥集團(tuán)有限公司提供)；甲醇、乙氰為色譜試劑，其余試劑均未分析純。

3．1　色譜條件

3．1．1　丹參酮I、丹參酮ⅡA：色譜柱：HypersilODS柱(250×4．0mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇：水(77：33)；流速：1．5ml／min；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；柱溫：40℃。在此條件下丹參素、原兒茶醛完全分離，且峰型穩(wěn)定。

3．1．2　丹參素、原兒茶醛；色譜柱Hypersit ODS柱(250×4．0mm，5μm)：流動(dòng)相：甲醇：乙氰：1％冰醋酸(含0．04％IPRB7試劑)為10；2：88；流速；1．0m1／min；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫：40℃．在此條件下丹參素、原兒茶醛完全分離，且峰型穩(wěn)定．

3．2　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

3．2．1　丹參酮I、丹參酮ⅡA標(biāo)準(zhǔn)曲線　分別取丹參酮I和丹參酮ⅡA對(duì)照品質(zhì)量，精密稱取，加甲醇適量，超聲15min使溶解，再加甲醇制成濃度為每1m1含丹參酮I和丹參酮ⅡA各80µg的對(duì)照品溶液I。精密吸取對(duì)照品溶液I加甲醇稀釋，制成每1mI含丹參酮I和丹參酮ⅡA10，20，30，40，50，60µg的標(biāo)準(zhǔn)品，置自動(dòng)樣器，按3．1．1項(xiàng)條件，自動(dòng)進(jìn)樣10μl，進(jìn)行色譜分析，以峰面積y對(duì)進(jìn)樣濃度C(μg／m1)回歸，求得回歸方程，線性關(guān)系良好，見表1。

3．2．2　丹參素和原兒茶醛標(biāo)準(zhǔn)曲線　分別取丹參素鈉和原兒茶醛對(duì)照品適量，精密稱取，加甲醇溶解并稀釋制成濃度為每1ml含丹參素和原兒茶醛分別為140µg和48µg的對(duì)照品溶液B。精密吸取對(duì)照品溶液H加甲醇稀釋，制成濃度分別為丹參素7，14，28，56，112，140µg／m1，原兒茶醛為2．4，4．8，9．6，19．2，38．4，48．0μg／mI的標(biāo)準(zhǔn)品，置自動(dòng)樣器，按3．1，2項(xiàng)條件，自動(dòng)進(jìn)樣10μl，進(jìn)行色譜分析，以峰面積y對(duì)進(jìn)樣濃度C(μg／mI)回歸，求得回歸方程，線性關(guān)系良好，見表1。

成分	線性范圍(μg)	回歸方程(n＝6)	r
丹參酮Ⅰ	0．10—0．60	y＝2．426C-1．586	0．9998
丹參酮ⅡA	0．10—0．60	y＝4．068C-1．797	0．9999
丹參素	0．70—1．40	y＝0．711C-1．86l	0．9997
原兒茶醛	0．024—0．48	y＝5．011C-3．944	0．9995

3．3　供試品制備及測(cè)定

3．3．1　取供試品10片，除去糖衣或薄膜衣，精密稱定，研細(xì)，取18，精密稱定，置于50m1容量瓶中，加入甲醇25mI，超聲處理15min，放冷，濾過，取續(xù)濾液，即得．按3．1．1項(xiàng)條件，自動(dòng)進(jìn)樣10μl，測(cè)定丹參酮I和丹參酮ⅡA，結(jié)果見表2。

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