| 公開(公告)號 | CN1227243C |
| 公開(公告)日 | 2005.11.16 |
| 申請(專利)號 | CN200410013559.4 |
| 申請日期 | 2004.02.18 |
| 專利名稱 | 一種高效制備紫杉醇的方法 |
| 主分類號 | C07D305/14 |
| 分類號 | C07D305/14 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 東北林業(yè)大學(xué);祖元剛 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 祖元剛;薛艷華;史 權(quán);付玉杰;唐中華;祖柏實;韓 梅;劉麗娜 |
| 地址 | 150040黑龍江省哈爾濱市動力區(qū)和興路26號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 黑龍江;23 |
| 主權(quán)項 | 一種制備紫杉醇的方法，其特征是：將鮮物料在溫度為0～30℃條件下避光放置1～15天后，在溫度為20～29℃條件下進(jìn)行勻漿空化生物半合成，得勻漿液再經(jīng)負(fù)壓空化混旋生物半合成及負(fù)壓空化混旋兩相培養(yǎng)處理；靜置分液，有機(jī)相濃縮至干，水相過濾得水相濾液，濾渣加入提取溶媒進(jìn)行負(fù)壓空化混旋固液萃��；合并空化混旋萃取液，經(jīng)減壓濃縮后回收提取溶媒得濃縮液，濃縮液與有機(jī)相濃縮物及水相濾液合并，加入檸檬酸或食草動物的膽汁經(jīng)負(fù)壓空化混旋處理，冷凍濃縮；濃縮物加入等體積甲醇溶解，緩慢置入等體積乙腈中，離心，得離心液，經(jīng)活性炭靜置脫色，過濾得無色液體，用乙酸乙酯進(jìn)行等體積萃取，萃取液水洗至中性，減壓濃干，濃縮物用乙腈溶解，沉淀析出，過濾得10-脫乙酰基巴卡亭III粗品，母液濃縮分別經(jīng)氧化鋁柱層析和制備型高效液相層析及重結(jié)晶得紫杉醇晶體，所述的鮮物料包括榛子、南方紅豆杉、東北紅豆杉、曼地亞紅豆杉、云南紅豆杉的莖皮、根或枝葉；所述的勻漿空化生物半合成是指將鮮物料置于勻漿機(jī)中，加入含有半合成前體或誘導(dǎo)子或混合糖原的生物半合成培養(yǎng)液，勻漿3～30分鐘，溫度：20～29℃，料液比：1∶4～1∶15，其中半合成前體為醋酸鈉、苯丙氨酸和苯甲酸鈉，誘導(dǎo)子為水楊酸、赤霉酸、硝酸銀、甲基茉莉酮酸、花生四烯酸、檸檬酸銨及茉莉酸甲酯，混合糖源為蔗糖與麥芽糖；所述的生物半合成培養(yǎng)液為水或pH值為4.0～5.8的磷酸緩沖液或B5培養(yǎng)液；所述的負(fù)壓空化混旋生物半合成是將勻漿液置于負(fù)壓空化罐中，其條件是溫度為20～29℃，時間2～5天，每間隔3～4小時空化一次，每次5～30分鐘，其底部進(jìn)氣的氣體類型包括空氣、氫氣、氧氣、二氧化碳、氮?dú)�，通氣量�?～3m3/min；所述的負(fù)壓空化兩相培養(yǎng)，有機(jī)相包括油酸、鄰苯二甲酸，在培養(yǎng)體系中的體積分?jǐn)?shù)為0.04～0.5；所述的提取溶媒為50～95％乙醇、甲醇、丙酮或體積比為1∶1的丙酮∶乙酸乙酯或體積比為80∶19∶1的乙醇∶水∶檸檬酸；所述的檸檬酸濃度為0.1～2％，食草動物的膽汁濃度為10～50％；所述的負(fù)壓空化混旋固液萃取，其條件為料液比1∶5～1∶20，在空化罐中空化10～30分鐘，通氣量為2～4m3/min，重復(fù)2～3次。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種高效制備紫杉醇的方法。其特征在于將鮮物料進(jìn)行勻漿空化生物半合成，再經(jīng)負(fù)壓空化混旋生物半合成及負(fù)壓空化混旋兩相培養(yǎng)處理；有機(jī)相濃縮至干，水相過濾得水相濾液，濾渣加入溶媒進(jìn)行負(fù)壓空化混旋固液萃取，合并萃取液，濃縮后與有機(jī)相濃縮物及水相濾液合并，加入檸檬酸或食草動物的膽汁經(jīng)負(fù)壓空化混旋處理，冷凍濃縮；濃縮物加入甲醇溶解，置入乙腈中，離心，活性炭脫色，得液體用乙酸乙酯萃取，萃取液水洗至中性，減壓濃干。濃縮物用乙腈溶解，沉淀析出10-脫乙酰基巴卡亭III，母液濃縮分別經(jīng)氧化鋁柱層析和制備型高效液相層析及重結(jié)晶得紫杉醇晶體。 |
| 國際公布 |
