全自動(dòng)生化分析儀具有微量、快速、多項(xiàng)、準(zhǔn)確、重復(fù)性好等特點(diǎn)。隨著全自動(dòng)生化分析儀的廣泛應(yīng)用，其測(cè)定過程中存在的交叉污染問題也受到關(guān)注。分析儀使用同一根試劑針吸取試劑，雖然分析儀有清洗系統(tǒng)，但試劑針很難通過一次短暫快速的清洗程序就清洗干凈，一個(gè)項(xiàng)目對(duì)隨后的一個(gè)項(xiàng)目甚至幾個(gè)項(xiàng)目都會(huì)帶來(lái)一定程度的試劑污染，并且隨著儀器使用時(shí)間的增加，試劑交叉污染程度會(huì)有所加劇。在工作中我們發(fā)現(xiàn)測(cè)定血脂后測(cè)定的總膽汁酸（TBA)，再?gòu)?fù)查時(shí)與醫(yī).學(xué)全在線m.gydjdsj.org.cn原來(lái)測(cè)定值有差異，為研究血脂試劑是否都影響TBA測(cè)定，我們實(shí)驗(yàn)觀察了TC，TG，HDL，LDL等試劑，對(duì)TBA是否存在交叉污染的情況進(jìn)行分析，報(bào)告如下。
1．材料與方法
1.1 儀器與試劑 OLYMPUS AU640全自動(dòng)生化分析儀由日本OLYMPUS公司提供，TC，TG，HDL，LDL試劑由日本協(xié)和試劑提供，TBA由日本第一化學(xué)試劑提供。
1.2 測(cè)定方法
1)首先對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng)，對(duì)比色杯、攪拌棒、試劑針進(jìn)行浸泡清洗，以排除儀器本身原因?qū)Y(jié)果的影響。
2)從當(dāng)天送檢標(biāo)本中提取血清，制備混合血清，取10份血清連續(xù)分別檢測(cè)TBA，此組數(shù)據(jù)設(shè)為TBA。
3)再取50份血清，從1號(hào)到50號(hào)排序，1號(hào)檢測(cè)TC，2，3，4，5號(hào)檢測(cè)TBA；6號(hào)檢測(cè)TC，7，8，9，10號(hào)檢測(cè)TBA；11號(hào)檢測(cè)TC，12，13，14，15號(hào)檢測(cè)TBA；16號(hào)檢測(cè)TC，17，18，19，20號(hào)檢測(cè)TBA；以此類推，檢測(cè)到50號(hào)。將2，6，12，16，22，26，32，36，42，46數(shù)據(jù)設(shè)為TC S1，將3，7，13，17，23，27，33，37，43，47數(shù)據(jù)設(shè)為TC S2，以此類推，得出數(shù)據(jù)TC S3，TC S4。
4)以同樣的方法得出數(shù)據(jù)TG S1~S4，HDL S1~S4，LDL S1~S4。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS軟件，進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。
2 ．結(jié)果
1)TBA與測(cè)定血脂后TBA測(cè)定值比較見表1。
表1 TBA與測(cè)定血脂后TBA測(cè)定值比較（略)
TBA數(shù)據(jù)分別與S1，S2，S3，S4進(jìn)行比較，結(jié)果見表2。在TC，HDL組，TBA與S1，S2，S3比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，與S4比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)。在TG，LDL組，TBA與S1比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，與S2，S3，S4比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)。
2)分別取TC，TG，HDL，LDL試劑2各10份，作為標(biāo)本檢測(cè)TBA，結(jié)果見表3。
表2 TBA分別與S1，S2，S3，S4配對(duì)t檢驗(yàn)P值表（略)
表3 血脂試劑2中TBA含量（略)
3．討論
OLYMPUS AU640全自動(dòng)生化分析儀的試劑針要接觸試劑盤中的各種試劑，每種不同項(xiàng)目間的吸取僅有一次沖洗過程，如果存在試劑交叉污染，將會(huì)對(duì)分析結(jié)果造成很大影響。由表2中可以看出血脂試劑對(duì)TBA檢測(cè)存在嚴(yán)重的交叉污染（P＜0.05)。TC，HDL試劑可以影響TBA三個(gè)測(cè)試，TG，LDL試劑可以影響TBA一個(gè)測(cè)試。試劑間的交叉污染原因是多方面的，主要有三個(gè)：第一，試劑成分中含有某種被污染的項(xiàng)目；第二，試劑中含有下一個(gè)測(cè)試所要測(cè)定底物或含有的某種試劑成分，與下一反應(yīng)所測(cè)定的底物有作用，因而直接影響下一反應(yīng)測(cè)定的結(jié)果；第三，該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)給下一個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)了間接干擾。從表3看出TC，HDL試劑2中對(duì)TBA正干擾物質(zhì)含量比較高，TG，LDL試劑2中對(duì)正干擾物質(zhì)含量少一些，這與表1交叉污染結(jié)果是一致的。對(duì)于血脂試劑中對(duì)TBA檢測(cè)產(chǎn)生正干擾的物質(zhì)的分析，從試劑成分看，血脂試劑2中均含有過氧化物酶，但未標(biāo)明其含量，它是否增強(qiáng)了TBA循環(huán)酶反應(yīng)，還是有其他物質(zhì)增強(qiáng)了反應(yīng)，有待于進(jìn)一步探討。在檢測(cè)中為避免血脂試劑對(duì)TBA檢測(cè)的影響，首先可以更改儀器參數(shù)，增加試劑針清洗次數(shù)；其次，可以調(diào)整試劑位，在血脂檢測(cè)與TBA測(cè)試之間，加做幾個(gè)對(duì)TBA無(wú)干擾的檢測(cè)項(xiàng)目；還可以運(yùn)用儀器本身的預(yù)防交叉污染程度、TBA反應(yīng)程序控制項(xiàng)目的反應(yīng)次序，先測(cè)試TBA，再測(cè)試血脂。但因?yàn)樵趯?shí)際工作中，標(biāo)本編排次序和項(xiàng)目組合的隨機(jī)性比較大，有時(shí)很難避開交叉污染，所以在編排標(biāo)本檢測(cè)順序時(shí)，一定要考慮到血脂項(xiàng)目對(duì)
TBA的影響。
由于試劑成分的復(fù)雜多樣性，實(shí)時(shí)儀器狀況的獨(dú)特性，可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同，要想得到正確可靠的結(jié)果，不但要熟練掌握儀器操作，對(duì)儀器要精心維護(hù)和保養(yǎng)，也要了解各反應(yīng)的原理，試劑組成，才能在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)和避免試劑間的交叉污染。
