執(zhí)業(yè)獸醫(yī)動物生物化學(xué)考試輔導(dǎo)資料:核酸的功能與分析技術(shù)
核酸:是遺傳信息的載體,分為RNA和DNA。所有細(xì)胞都同時含有這兩種核酸:①真核細(xì)胞中,DNA存在于染色體上;RNA存在于細(xì)胞質(zhì)中,微粒體含量最多。②原核細(xì)胞(細(xì)菌中),DNA存在于核質(zhì)部分,RNA則分布在胞液。
生物個體的任何一個細(xì)胞含有相同數(shù)量和質(zhì)量的DNA,而RNA的含量通常是變動的。
核酸的組成:核酸→低聚核苷酸→單核甘酸:①磷酸;②核苷:1、DNA含有:T、C、A、G 2、RNA含有:U、C、A、G
核酸的結(jié)構(gòu):
一級結(jié)構(gòu):為線性的生物大分子,DNA由許多脫氧核糖核苷酸以磷酸二酯鍵連接而成。其堿基A與T、G與C的摩爾比接近為1,稱為堿基常量定律。
二級結(jié)構(gòu):DNA為雙螺旋結(jié)構(gòu)。
RNA包括:mRNA(信技RNA);rRNA(核糖酸RNA);tRNA(轉(zhuǎn)移RNA)
核酸的性質(zhì):①一般性質(zhì):酸性(DNA);乙醇可沉淀DNA;堿基環(huán)在260nm處有紫外線最大吸收值。②變性:指堿基對之間的氫鍵斷裂。DNA加熱變性后,在260nm處紫外線吸收值升高,稱為增色效應(yīng)。(解鏈溫度:將50%的DNA分子發(fā)生變性時的溫度稱為“、、、、”;堿基對含量愈高、其值越大。)③復(fù)性:DNA的變性是可逆過程④分子雜交:DNA/RNA經(jīng)復(fù)性處理時,其互補(bǔ)的堿基序列可以配對,經(jīng)雜合而形成雜交分子。
DNA的復(fù)制:以親代DNA分子為模板合成兩個完全相同的子代DNA分子的過程。
翻譯:以RNA為模板知道合成蛋白質(zhì)的過程。
轉(zhuǎn)錄:以DNA為模板合成RNA的過程。
中心法則:遺傳信息按DNA→RNA→蛋白質(zhì)的方向轉(zhuǎn)移。
半保留復(fù)制:兩個新的子代DNA分子中除了一股新合成的DNA鏈外,都保留了一股來自親代的舊鏈。
參與DNA復(fù)制的酶:①拓?fù)洚悩?gòu)酶:改變DNA拓?fù)湫再|(zhì)的酶可供DNA的一條或兩條鏈斷裂和再聯(lián)接。②DNA解旋酶:破壞DNA雙鏈之間的氫鍵,供DNA解鏈,需要ATP供能。③DNA引發(fā)酶:負(fù)責(zé)合成一個小片段RNA,作為新鏈DNA的引物,醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站m.gydjdsj.org.cn此酶就是一種RNA的聚合酶,受利福平抑制。④DNA聚合酶:1、5’→3’合成新鏈。2、3’→ 5’外切,用于自我校對3、 5’→3’外切,用于切除引物。⑤DNA連接酶:將各片段之間形成3’,5’-磷酸二酯鍵,,使新鏈都連續(xù)完整。此酶2在DNA修復(fù)、重組剪接過程中起著重要作用,是基因工程中的工具酶。⑥單鏈DNA結(jié)合蛋白:穩(wěn)定解開的DNA維持單鏈狀態(tài)。⑦端粒和端粒酶:是真核生物線性染色體DNA末端的一個特殊結(jié)構(gòu),防止染色體間末端連接。
DNA復(fù)制的過程:復(fù)制的原點(diǎn)→解鏈解旋→合成引物→鏈的延伸→切除引用和填補(bǔ)空隙。
DNA損傷:1、DNA重組、病毒的整合、紫外線、電離輻射、化學(xué)誘變劑。結(jié)果:引起生物突變,甚至導(dǎo)致死亡。
DNA修復(fù):1、光修復(fù);2、暗修復(fù):切除修復(fù)、重組修復(fù)。
RNA的轉(zhuǎn)錄:①是以DNA為模板合成RNA的過程。②轉(zhuǎn)錄誤差大(即轉(zhuǎn)錄忠實(shí)性較弱)。③轉(zhuǎn)錄方向:5’→3’;轉(zhuǎn)錄不需要引物。④轉(zhuǎn)錄RNA時有連續(xù)堿基U時,則停止轉(zhuǎn)錄。⑤轉(zhuǎn)錄后的修飾:1、首尾修飾:在mRNA的5’末端加帽以及在其3’末端加上多聚腺苷酸的尾。2、剪接修飾:經(jīng)轉(zhuǎn)錄形成的mRNA前體可在酶的作用下切除內(nèi)含子,拼接外顯子。
反轉(zhuǎn)錄:以RNA為模板合成DNA的過程。這個過程由RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶(反轉(zhuǎn)錄酶)催化。
蛋白質(zhì)的翻譯:①定義:在細(xì)胞質(zhì)中以mRNA為模板,在核糖體、tRNA和多種蛋白因子與酶的共同參與下,將mRNA中由核苷酸序列決定的遺傳信息轉(zhuǎn)變成由20種氨基酸組成的蛋白質(zhì)的過程。②mRNA:信使RNA;是蛋白質(zhì)合成的“藍(lán)圖”。3個相鄰堿基組成1個密碼子;醫(yī).學(xué).全.在線.網(wǎng).站.提供起始密碼:AUG、GUG;終止密碼:UAA、UAG、UGA;密碼子特點(diǎn):1、兼并性2、通用性;3、不重疊(即連續(xù)性)③tRNA:氨基酸的“搬運(yùn)工”每種tRNA的反密碼子,決定了所帶氨酸能準(zhǔn)確的在mRNA上對號入座。④rRNA:與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成核糖體,是蛋白質(zhì)合成的“裝配機(jī)”(核糖核蛋白體)。有三個功能位點(diǎn):P、A、E位點(diǎn)。⑤翻譯過程:氨基酸的活化→肽鏈的起始→肽鏈的延長→合成的終止→翻譯后加工。
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