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重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)的制備方法

公開(公告)號(hào) CN1212336C  
公開(公告)日 2005.07.27  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02153384.9  
申請(qǐng)日期 2002.11.29  
專利名稱 重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)的制備方法  
主分類號(hào) C07K14/635  
分類號(hào) C07K14/635;C12N1/21;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/02  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 西南生物工程產(chǎn)業(yè)化中試基地有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 胡昌華;李明;何建軍;徐輝  
地址 400060 重慶市南坪回龍工業(yè)區(qū)丹回路中試基地  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所  
代理人 王為  
國(guó)省代碼 重慶;85  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人甲狀旁腺激素類似物,其基酸序列見序列表中序列1。  
摘要 本發(fā)明涉及重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)的制備方法,該方法通過構(gòu)建了一種新的工程菌株,使表達(dá)產(chǎn)量提高,純化工藝簡(jiǎn)單,成本降低。本發(fā)明采用大腸桿菌簡(jiǎn)并密碼子修改序列的對(duì)應(yīng)cDNA,基本序列為L(zhǎng)-V-P-R-PTH(1-34),其中L-V-P-R為凝血酶的酶切位點(diǎn)。在其核苷酸序列末端加大腸桿菌終止密碼子TAA;為便于克隆,在序列的5’-端加EcoR I的酶切位點(diǎn),3’-端加Sal I的酶切位點(diǎn)。通過對(duì)該工程菌的發(fā)酵、包涵體提取、稀釋復(fù)性、凝血酶酶切、陰離子交換層析、反相層析、陽(yáng)離子交換層析等步驟得到高純度的重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)。  
國(guó)際公布  
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