公開(公告)號(hào)
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CN1212336C
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公開(公告)日
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2005.07.27
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02153384.9
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申請(qǐng)日期
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2002.11.29
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專利名稱
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重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)的制備方法
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主分類號(hào)
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C07K14/635
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分類號(hào)
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C07K14/635;C12N1/21;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/02
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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西南生物工程產(chǎn)業(yè)化中試基地有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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胡昌華;李明;何建軍;徐輝
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地址
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400060 重慶市南坪回龍工業(yè)區(qū)丹回路中試基地
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所
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代理人
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王為
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國(guó)省代碼
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重慶;85
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主權(quán)項(xiàng)
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一種重組人甲狀旁腺激素類似物,其氨基酸序列見序列表中序列1。
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摘要
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本發(fā)明涉及重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)的制備方法,該方法通過構(gòu)建了一種新的工程菌株,使表達(dá)產(chǎn)量提高,純化工藝簡(jiǎn)單,成本降低。本發(fā)明采用大腸桿菌簡(jiǎn)并密碼子修改序列的對(duì)應(yīng)cDNA,基本序列為L(zhǎng)-V-P-R-PTH(1-34),其中L-V-P-R為凝血酶的酶切位點(diǎn)。在其核苷酸序列末端加大腸桿菌終止密碼子TAA;為便于克隆,在序列的5’-端加EcoR I的酶切位點(diǎn),3’-端加Sal I的酶切位點(diǎn)。通過對(duì)該工程菌的發(fā)酵、包涵體提取、稀釋復(fù)性、凝血酶酶切、陰離子交換層析、反相層析、陽(yáng)離子交換層析等步驟得到高純度的重組人甲狀旁腺激素PTH(1-34)。
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國(guó)際公布
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