| 公開(公告)號(hào) | CN1680550A |
| 公開(公告)日 | 2005.10.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410018835.6 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.04.05 |
| 專利名稱 | 一種重組人尿激酶原的純化方法 |
| 主分類號(hào) | C12N9/72 |
| 分類號(hào) | C12N9/72;C07K1/14 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 天津天士力制藥股份有限公司;上海天士力藥業(yè)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 肖成祖;張正光;姜燕;胡顯文;胥照平;李世崇;劉健;高麗華 |
| 地址 | 300402天津市北辰科技園區(qū)新宜白大道遼河?xùn)|路1號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國(guó)省代碼 | 天津;12 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組人尿激酶原的純化方法，其特征在于該方法包括如下步驟：A.用陽離子交換Streamline-SP擴(kuò)張床色譜從工程細(xì)胞培養(yǎng)上清中回收重組人尿激酶原；B.用SephacrylS-200凝膠色譜進(jìn)一步純化上述A收集的尿激酶原粗產(chǎn)品；C.用對(duì)氨基苯甲脒-SepharoseFastFlow親和色譜法除去粗產(chǎn)品中的尿激酶；D.用DEAE-SepharoseFastFlow陰離子交換色譜除去重組人尿激酶原中殘留細(xì)胞的DNA。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種重組人尿激酶原的純化方法，更具體地說是用色譜技術(shù)純化制備重組人尿激酶原的方法。為了解決動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的尿激酶原的大規(guī)模純化問題，本發(fā)明公開了一種用Streamline-SP擴(kuò)張床色譜、Sephacryl S-200凝膠色譜、對(duì)氨基苯甲脒Sepharose Fast FlowFlow親和色譜和DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換色譜法，從哺乳動(dòng)物工程細(xì)胞培養(yǎng)液回收基因工程產(chǎn)品的方法。還可以在步驟C和D之間包括步驟E：用陽離子交換Streamline-SP固定床色譜柱濃縮尿激酶原。采用上述方法得到符合SFDA要求的重組人尿激酶原，總回收率在70％以上，純度達(dá)到99％以上。 |
| 國(guó)際公布 |
