| 公開(公告)號 | CN1263771C |
| 公開(公告)日 | 2006.07.12 |
| 申請(專利)號 | CN03129304.2 |
| 申請日期 | 2003.06.16 |
| 專利名稱 | 骨保護素融合蛋白的制備方法和用途 |
| 主分類號 | C07K19/00(2006.01)I |
| 分類號 | C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P19/10(2006.01)I;A61P19/08(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海富純中南生物技術有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 倪 健;楊武劍;羅 鵬;楊子義;遲志永 |
| 地址 | 201702上海市徐涇鎮(zhèn)華徐公路422號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海專利商標事務所有限公司 |
| 代理人 | 徐 迅 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種產生OPG融合蛋白的方法，其特征在于，該方法包括： (a)將編碼OPG、其變體或片段的核苷酸序列和編碼Fc蛋白、其變體或片段的核苷酸序列可操作地連于表達載體，得到OPG融合蛋白重組表達載體； (b)將步驟(a)中的重組表達載體轉入甲醇酵母，篩選獲得表達OPG融合蛋白的工程菌； (c)在合適的條件下發(fā)酵培養(yǎng)步驟(b)獲得的工程菌； (d)從步驟(c)中的發(fā)酵培養(yǎng)產物中純化分離所述融合蛋白；其中，所述融合蛋白的形式為R1-L-R2和R1-R2，其中R1為OPG蛋白、或其變體或片段，R2為Fc蛋白、或其變體或片段，L為接頭； 其中，所述OPG蛋白、或其變體、片段選自： (1)SEQIDNO：1所示的OPG蛋白序列； (2)氨基酸序列22-X，其中X為SEQIDNO：1所示的包括位置185-401的任何殘基； (3)在(2)所述的氨基酸序列前加上Ile-Asp兩個氨基酸； (4)在(2)所述的氨基酸序列前加上Met； 所述Fc蛋白、或其變體或片段選自： (A)SEQIDNO：2所示的氨基酸序列； (B)亞部分(A)的氨基酸序列，在以下一個或多個位置具有取代或缺失的不同氨基酸，其中的編號采用SEQIDNO：2的序列編號： i.一個或多個半胱氨酸殘基； ii.一個或多個酪氨酸殘基； iii.缺失或用丙氨酸取代位置5的半胱氨酸； iv.缺失或用谷氨酰胺取代位置20的谷氨酸； v.缺失或用丙氨酸取代位置130的谷氨酸； vi.缺失或用丙氨酸取代位置105的賴氨酸； vii.缺失或取代位置107的賴氨酸； viii.缺失N端1-17位的氨基酸序列； ix.取代或缺失一個或多個殘基以消除Fc受體結合位點； x.取代或缺失一個或多個殘基以消除補體(Clq)結合位點； xi.亞部分i-x的組合。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種OPG融合蛋白的生產方法和用途，它為R1-L-R2形式，其中R1為OPG蛋白、其變體或片段，R2為Fc蛋白、其變體或片段；L為接頭。本發(fā)明獲得的融合蛋白可用于治療骨質疏松和腫瘤相關骨損失等。 |
| 國際公布 |
