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一種同時(shí)檢測(cè)A、B、C三組人輪狀病毒的膜基因芯片及制備方法與應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN1810991A  
公開(公告)日 2006.08.02  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510104338.2  
申請(qǐng)日期 2005.10.26  
專利名稱 一種同時(shí)檢測(cè)A、B、C三組人輪狀病毒的膜基因芯片及制備方法與應(yīng)用  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 海燕;韓金祥;王健偉  
地址 250062山東省濟(jì)南市經(jīng)十路89號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南圣達(dá)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 鄭華清  
國(guó)省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種同時(shí)檢測(cè)A、B、C三組人輪狀病毒的膜基因芯片,包括尼龍膜基片和陣列式分布的寡核苷酸探針與對(duì)照及空白的點(diǎn)涂層,其特征在于,所述的尼龍膜基片是帶正電荷的尼龍膜;所述的寡核苷酸探針與對(duì)照及空白的點(diǎn)涂層分布于尼龍膜基片上,包括6條不同組別的人輪狀病毒組特異性檢測(cè)探針,1條陽(yáng)性對(duì)照探針,4條陰性對(duì)照探針以及空白點(diǎn)樣液對(duì)照,其中, 所述的6條人輪狀病毒組特異性檢測(cè)探針的基因序列是: ProbeA1:5′-ATTTATTGAATGCTTCGATAT-3′ ProbeA2:5′-ACTGGTGAGTGGATTGTTTGA-3′ ProbeB1:5′-ATCCCATTTGAGTAAATTCAG-3′ ProbeB2:5′-ATGATAATTCAGCCAAGCC-3′ ProbeC1:5′-CTGTATTAGCTACATGACCGT-3′ ProbeC2:5′-AGCTATTGGAGTTTGGTAGTT-3′ 所述1條陽(yáng)性對(duì)照探針的基因序列是: PbP:5′-ATTTATTGAATGCTTCGATAT-3′ 所述4條陰性對(duì)照探針的基因序列分別是: PbEC:5′-GATGAGAATGTGCCTTCGGGAA-3′ PbSA:5′-GAACATATGTGTAAGTAACTGTGC-3′ PbHBV:5′-AGAAAGACCTTTAACCTA-3′ PbPSE:5′-TAGGTGGTTCAGCAAGTTGGAT-3′ 上述的陽(yáng)性對(duì)照探針在其5′端帶地高辛標(biāo)記; 上述每種探針與對(duì)照及空白的點(diǎn)涂層在尼龍膜基片表面點(diǎn)制2個(gè)平行點(diǎn),各點(diǎn)的直徑為0.25mm,點(diǎn)間距為0.8mm,點(diǎn)涂層微陣列的大小為4.5mm×5.5mm。  
摘要 本發(fā)明公開了一種同時(shí)檢測(cè)A、B、C三組人輪狀病毒的膜芯片,包括帶正電荷的尼龍膜和陣列式分布于玻璃基片上的寡核苷酸探針、對(duì)照和空白的點(diǎn)涂層,所述點(diǎn)涂層是6條不同組別的人輪狀病毒組特異性檢測(cè)探針,1條陽(yáng)性對(duì)照探針,4條陰性對(duì)照探針以及空白點(diǎn)樣液對(duì)照,并且所述的陽(yáng)性對(duì)照探針5′端加地高辛標(biāo)記。本發(fā)明還公開了所述芯片的制備方法及其作為臨床診斷試劑的應(yīng)用方法。本發(fā)明的芯片采用多重PCR擴(kuò)增方式,使待檢測(cè)核酸帶上地高辛標(biāo)記,通過(guò)免疫顯色獲取雜交結(jié)果,可同時(shí)用于對(duì)多組人輪狀病毒的基因檢測(cè)和組別鑒定,具有廣闊的應(yīng)用前景,有望滿足食品衛(wèi)生監(jiān)測(cè),疾病預(yù)防控制和臨床醫(yī)療領(lǐng)域?qū)θ溯啝畈《緳z測(cè)的需要。  
國(guó)際公布  
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