金銀花提取物-綠原酸類(lèi)成分-HPLC

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方法名稱(chēng)：

應(yīng)用范圍：

本方法適用于金銀花提取物中綠原酸、3，5-二咖啡�；�奎寧酸的含量測(cè)定

方法原理：

本品加水煎煮提取，經(jīng)液相色譜分離，在327 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器 Agilent-1100高效液相色譜儀，四元泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，DAD二極管陣列檢測(cè)器，AgilentAl0. 02工作站

色譜條件色譜柱：Kromasil C₁₈（4. 6 mm ×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：A為乙腈，B 為0. 3 磷酸溶液，A：0→20 min 5 →10，20→45 min 10 →26；流速：1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：327 nm；柱溫：30 ℃

試樣制備：

對(duì)照品溶液制備分別精密稱(chēng)取綠原酸和3，5-二咖啡�；鼘幩徇m量，加50 甲醇制成每1 mL含綠原酸0. 408 mg、3，5-二咖啡酰奎寧酸0. 278 mg的混合溶液。精密吸取6 mL置10 mL量瓶中，加50 甲醇至刻度，搖勻，即得。

供試品溶液制備取金銀花藥材200 g，3份，分別照文獻(xiàn)所收載的石-硫法和改良石-硫法進(jìn)行提�。▋纱渭逯笥盟烤謩e為20倍和12倍) 、處理，得濃縮液，繼續(xù)減壓濃縮得稠膏，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，分別得3種金銀花提取物A、B、C。取提取物A、B細(xì)粉各75 mg、提取物C細(xì)粉25 mg，精密稱(chēng)定，分別置10 mL量瓶中，加50 甲醇至刻度，振搖使完全溶解（B有少量不溶物)，0. 45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

操作步驟：

分別精密吸取綠原酸和3，5-二咖啡�；鼘幩峄旌蠈�(duì)照液以及金銀花供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算綠原酸和3，5-二咖啡�；鼘幩岷�。

附件：

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備注：

參考文獻(xiàn)：

陳有根等. 3種經(jīng)典工藝生產(chǎn)的金銀花提取物中綠原酸類(lèi)成分含量比較. 中成藥.2007，29（3)：362～364

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