方法名稱： |
積雪草總苷元—羥基積雪草酸的含量測定—HPLC-DAD |
應用范圍： |
用于50%積雪草總苷元中羥基積雪草酸含量的測定 |
方法原理： |
本品用甲醇溶解，經液相色譜儀分離，在204nm測定峰面積，按標準曲線法計算含量。 |
儀器設備及實驗條件： |
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儀器設備 美國Waters公司生產的高效液相色譜系統(tǒng)，配Waters 515型泵、996型二極管陣列檢測器；Agilent1100型液質聯(lián)用儀 (LC-MSD ) 。 | 色譜條件 色譜柱： Agilent Zorbax SB-C18柱( 150mm×4.6 mm，5 μm ) ；保護柱： Shimadzu Shim –packODS；流動相：甲醇-水(體積比為65∶35，含4mmol /L β-CD ，以乙酸調節(jié)pH值為4)；流速0.4mL /min；檢測波長：204nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL。 |
試樣制備： |
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對照品溶液制備 精密稱取羥基積雪草酸對照品 10.0 m g,用甲醇配制成10.0 g /L的溶液，然后用甲醇進行倍比稀釋，配成質量濃度依次為 5.0，2.0，1.0， 0.5和 0.1g /L的羥基積雪草酸對照品甲醇溶液，以峰面積( y )對質量濃度 ( x，g /L )進行線性回歸，羥基積雪草酸的回歸方程為 y = 116.54x – 10.058， r2=019989。結果表明。樣品量在 0.1～5.0 g /L范圍內濃度與峰面積呈線性關系。 | 供試品溶液的制備 精密稱取50%積雪草總苷元適量，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，配制成50%積雪草總苷元甲醇溶液5.58 g /L 備用，。進樣前用0.45μm 微孔濾膜過濾。 |
操作步驟： |
精密吸取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以標準曲線法法計算羥基積雪草酸含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:m.gydjdsj.org.cn)
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備注： |
采用在甲醇-水流動相中添加β-環(huán)糊精的方法分離了羥基積雪草酸和其同分異構體termi-nolic acid,并測定了50%積雪草總苷元中羥基積雪草酸的含量。 |
參考文獻： |
潘見，開桂青，袁傳勛.β-環(huán)糊精流動相添加劑法分離測定積雪草總苷元中的羥基積雪草酸. 色譜.2007，25（3)：316～318 |
