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木通-皂苷類成分的含量測定方法-RP-HPLC

  
方法名稱:
  木通-皂苷類成分的含量測定-RP-HPLC
應用范圍:
  用于木通中皂苷類成分的含量測定
方法原理:
 本品細粉加70 %甲醇超聲提取、水飽和乙酸乙酯萃取,經液相色譜分離,在203 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器    Hewlett-Packard 1100單泵高效液相色譜儀

試劑    Saponin PJ1mutongsaponin C對照品由本實驗室分離純化并鑒定結構,純度>98 %

色譜條件    色譜柱:Phenomenex Luna C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm);流動相:甲醇-乙腈-水-磷酸(20∶20∶60∶0.1);流速:1.0 mL/min;柱溫:35 ℃;檢測波長:203 nm
試樣制備:
 

對照品溶液制備    分別精密稱取saponin PJ1mutongsaponin C對照品2.01.7 mg置于10 mL的量瓶中,甲醇溶解并稀釋至刻度得0.200.17 g/L的混合對照品溶液,即得。

供試品溶液制備    取藥材粉末(60目)約1.0 g,精密稱定,置具塞三角瓶中,精密加入體積分數(shù)為70 %的甲醇50 mL,精密稱定,超聲提取30 min,補足重量,搖勻,濾過。精密量取續(xù)濾液30 mL,減壓蒸干溶劑,殘渣以10 mL水分次洗滌,合并各次洗滌液并轉入分液漏斗中,以水飽和乙酸乙酯萃取3次,每次10 mL,棄去乙酸乙酯液,水層用水飽和正丁醇萃取5次,每次10 mL,合并萃取液,置蒸發(fā)皿中蒸干,殘渣以體積分數(shù)為70 %甲醇溶解、洗滌并定容于5.0 mL量瓶中,用0.45 μm微孔濾膜過濾,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取saponin PJ1和mutongsaponin C對照液以及木通供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算saponin PJ1和mutongsaponin C含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻:
  高慧敏,王智民,付雪濤等. RP-HPLC測定木通藥材中皂苷類成分的含量.中國藥學雜志. 2007,42(1):20~23
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