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木瓜-咖啡酸、綠原酸的含量測定方法-HPLC

　　
方法名稱：
   木瓜-咖啡酸、綠原酸的含量測定-HPLC
應用范圍：
   用于木瓜中咖啡酸、綠原酸的含量測定
方法原理：
  本品細粉加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在283 nm處測定峰面積，外標法計算含量
儀器設備及實驗條件：
  

儀器    DIONEX（P680HPLC PUMP，SOLVENTRACK SOR-100)

    色譜條件    色譜柱：Kromasil  C18（10 nm～5 μm，4.6 mm×250 mm)；流動相： （A)乙腈-甲醇（6∶4) （B)0. 05 %磷酸梯度洗脫，0～12 min（10 %～30 %A，90 % ～70 %B)，12～30 min（30 %～50 %A，70 %～50 %B)，30～35 min （50 %～70 %A，50 %～30 %B)，35～45 min （70 %～90 %A，30 %B～10 %B)，45～50 min （90 %～60 %A，10 %～40 %B)，50～60 min（60 %～10 %A，40 %～90 %B)，60～70 min （10 %A，90 %B)；流速：0. 8 mL/min；檢測波長：283 nm
試樣制備：
  

對照品溶液制備    分別精密稱取咖啡酸、綠原酸對照品適量，分別加甲醇制成每毫升含0. 106 mg咖啡酸、0. 492 mg綠原酸對照品溶液；然后分別精密吸取咖啡酸對照品溶液5 mL、綠原酸對照品溶液1 mL，加甲醇定容至25 mL，制成兩種對照品的混合溶液。

供試品溶液制備    精密取藥材粉末0. 25 g于100 mL具塞錐形瓶中，精密吸取50 mL甲醇，稱重，蓋好瓶塞后超聲提取45 min，稱量，并用甲醇補足重量，放冷至室溫，濾過，取續(xù)濾液，然后用0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。
操作步驟：
   分別精密吸取咖啡酸、綠原酸對照液以及木瓜供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算咖啡酸、綠原酸含量。
附件：
   點擊下載 (解壓密碼:m.gydjdsj.org.cn)
備注：
  
參考文獻：
   黃志軍，陶君彥，熊富良等. 木瓜水溶性部位高效液相色譜法指紋圖譜研究. 時珍國醫(yī)國藥. 2006，17（10)：1869～1871
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