注射用雙黃連(凍干)－連翹甙的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定注射用雙黃連（凍干)中連翹甙的含量。

本方法適用于中藥制劑注射用雙黃連（凍干)。

供試品加甲醇超聲處理，濾過(guò)，續(xù)濾液作為供試液，點(diǎn)樣、展開(kāi)，以10%硫酸乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=530nm測(cè)量連翹甙吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 甲醇

2 .氯仿

3. 硫酸

4. 乙醇

1. 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.3展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2. 材料

高效硅膠G板。

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取連翹甙對(duì)照品0.62mg，加甲醇使溶解，并定容成2mL，制成每1mL各含0.31mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品粉末（過(guò)五號(hào)篩-80目)約1g，精密加25mL甲醇，超聲處理20min，濾過(guò)，續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液10μL、對(duì)照品溶液2μL與5μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

2. 展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以氯仿-甲醇（10:2)溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)至8～15cm時(shí)，取出薄層板，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，晾干。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取對(duì)照品溶液1，2，3，4，5μL，分別點(diǎn)于同一塊薄層板上，展開(kāi)顯色后，掃描測(cè)定，以點(diǎn)樣量對(duì)吸收度峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

4. 含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用單波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ_S =530nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

劉杰，陳卓，馬開(kāi). 薄層掃描法測(cè)定雙黃連制劑中連翹甙的含量. 中成藥，1999，21（8)：394-396.