課程名稱

臨床檢驗基礎(chǔ)學(xué)

授課題目（章節(jié)或主題)

Wright染色原理、紅細(xì)胞計數(shù)

授課教師

吳曉蔓

所屬二級學(xué)院

檢驗系

所屬教研室

臨床檢驗基礎(chǔ)

職稱

教授

授課時間

2008年2月28 日第1 周 星期四 第 1～2節(jié)第1 次課

授課時數(shù)

2學(xué)時

授課班級

  檢驗 專業(yè)（本科√  �？啤�)2005   級   1，2，3   班

教學(xué)課型

理論課√ 實驗課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 實習(xí)（踐)課□  其它□

教材名稱、作者、出版社及出版時間

臨床檢驗基礎(chǔ) 熊立凡主編 人民衛(wèi)生出版社 2007第四版

教學(xué)目標(biāo)與要求：

掌握

1、血細(xì)胞Wright、Giemsa染色原理

2、紅細(xì)胞計數(shù)有哪些方法？紅細(xì)胞顯微鏡計數(shù)法原理如何？紅細(xì)胞計數(shù)的參考方法是什么？

了解

1、什么是血細(xì)胞計數(shù)的誤差？如何避免或減少？

2、血涂片制備方法臨床實驗室經(jīng)常開展的紅細(xì)胞檢驗項目有哪些？

主要知識點、重點與難點：

主要知識點：血細(xì)胞Wright染色原理，紅細(xì)胞顯微鏡計數(shù)法原理

重點與難點：血細(xì)胞Wright染色原理

教學(xué)方法（請打√選擇)：

講授法√　 討論法√ 　演示法□　 自學(xué)輔導(dǎo)法□　 　練習(xí)法(習(xí)題或操作) □　讀書指導(dǎo)法□

ＰＢＬ醫(yī)學(xué)三基（以問題為中心的教學(xué)法)□　　案例法□　 其他□

教學(xué)媒體（請打√選擇)：

教材√  板書√  實物□  標(biāo)本□  掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□   錄像√   CAI（計算機輔助教學(xué))□

教學(xué)過程設(shè)計（包括講授內(nèi)容、講授方法、時間分配、媒體選用、設(shè)計等)：

第一章  血液標(biāo)本采集與血涂片制備 

第三節(jié)  血涂片制備與染色

一張合格的血涂片應(yīng)該是厚薄適宜，血膜頭、體、尾明顯，發(fā)布均勻，邊緣整齊，兩邊留有一定的空隙，因此要熟練掌握推片技術(shù)和染色條件。

一、血涂片制備

1.載玻片要求　

2.手工推片法

3.厚血膜涂片法 

4.儀器自動涂片法 

二、血涂片染色

１．用于血片染色的染料

（1)堿性染料：為陽離子染料，主要是染細(xì)胞核的染料如美藍、天青、蘇木素等。

（2)酸性染料：為陰離子染料，主要有伊紅Y和伊紅B，這兩種染料特別適于與噻嗪類燃料（亞甲藍、天青B等)作對比染色，形成紅藍分明、色澤艷麗的結(jié)果。

（3)復(fù)合染料：同時具有陰、陽離子型的染料如Wright（瑞氏)染料、Giemsa（姬姆薩)染料。

2.血涂片常用染色方法

（1)Wright染色法

【染色原理】

1)染料的組成：

2)pH值的影響：

【注意事項】

1)Wright染液質(zhì)量：

2)染色時間與染液濃度：

3)染色時：

4)沖洗時：

5)染色過深：

（2)Giemsa染色法

【原理】  染色原理和結(jié)果與Wright染色法基本相同。但提高了噻嗪染料的質(zhì)量，加強了天青的作用，本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差。

一、紅細(xì)胞計數(shù)

臨床實驗室經(jīng)常開展的紅細(xì)胞檢驗項目有：紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白測定、紅細(xì)胞形態(tài)觀察、紅細(xì)胞平均參數(shù)計算、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)、嗜堿性點彩紅細(xì)胞計數(shù)和紅細(xì)胞沉降率測定等。紅細(xì)胞檢驗的臨床應(yīng)用價值見表2-1。

紅細(xì)胞計數(shù)測定單位體積血液中的紅細(xì)胞數(shù)量，是血液一般檢驗的基本項目。

【檢測原理】

顯微鏡計數(shù)法  采用等滲稀釋液將血標(biāo)本稀釋一定倍數(shù)（200倍)，滴入血細(xì)胞計數(shù)室中，顯微鏡下計數(shù)一定區(qū)域內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算得到每升血液中紅細(xì)胞的數(shù)量，以N×10¹²/L進行報告。

【方法學(xué)評價】顯微鏡計數(shù)法和血液分析儀法各有特點，見表2-2。紅細(xì)胞計數(shù)的參考方法為：用精密吸管手工稀釋標(biāo)本，半自動血液分析儀（電阻抗原理)進行紅細(xì)胞計數(shù)。

【質(zhì)量保證】血細(xì)胞計數(shù)的誤差分別來源于技術(shù)誤差、儀器誤差和分布誤差（表2-3)，可通過消除或減少誤差進行紅細(xì)胞計數(shù)的質(zhì)量控制。

【參考值】①成年：男性 （4.09～5.74)×10¹²/L，女性 （3.68～5.13)×10¹²/L；②新生兒（5.2～6.4)×10¹²/L；③嬰兒（4.0～4.3)×10¹²/L；④兒童（4.0～4.5)×10¹²/L。

【臨床應(yīng)用】

1、生理性變化  紅細(xì)胞數(shù)受到許多生理因素影響，但與同年齡、性別人群的參考值相比，一般在±20%以內(nèi)。

表2-4  紅細(xì)胞數(shù)的生理性變化及可能機制

2、病理性變化

1)病理性增多見表2-5

表2-5  紅細(xì)胞病理性增多及可能機制

2)病理性減少：各種原因?qū)е录t細(xì)胞、血紅蛋白低于參考值下限，為紅細(xì)胞和血紅蛋白減少，通常稱為貧血。貧血的診斷并不難，通過紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白測定或血細(xì)胞比容可確定有無貧血和貧血的程度；貧血的原因診斷較為困難，一般應(yīng)結(jié)合臨床和進一步檢查。按病因，可將貧血分為紅細(xì)胞生成障礙、過度破壞和丟失3大類，某些藥物也可引起貧血（表2-6，2-7)。

紅細(xì)胞計數(shù)醫(yī)學(xué)決定水平：①高于6.8×10¹²/L，應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施；②＜3.5×10¹²/L為診斷貧血的界限，應(yīng)繼續(xù)尋找原因；③＜ 1.5×10¹²/L應(yīng)考慮輸血。

表2-6  貧血的病因?qū)W分類

表2-7 藥物性貧血的作用機制及常見藥物舉例

提問、課堂討論等師生互動的設(shè)計：

1.簡述抗凝劑的選擇。

2. 紅細(xì)胞顯微鏡計數(shù)法原理如何？

3.簡述血液標(biāo)本的保存。

&nbs醫(yī)學(xué)考研網(wǎng)p;

教學(xué)小結(jié)、復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置：

1.何為一張良好的血涂片？

2.如何對血涂片染色進行質(zhì)量控制？

教學(xué)中的創(chuàng)新點（加強基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語運用、啟發(fā)學(xué)生思維、指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)、介紹學(xué)科新進展等方面)：

增加視頻教學(xué)，讓學(xué)生有直觀認(rèn)識。提出全程質(zhì)量控制和質(zhì)量管理的概念。要求技術(shù)熟練，操作規(guī)范，理論聯(lián)系實際，檢驗結(jié)果必須結(jié)合臨床表現(xiàn)等資料

參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等)：

1. 叢玉隆 ,王淑娟主編:《今日臨床檢驗學(xué)》, 中國科學(xué)技術(shù)出版社,1997年。  

2．叢玉隆 ,樂家新，秦小玲，楊宏偉，王丹玲主編:《血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床》,天津科學(xué)技術(shù)出版社, 2002年。

教研室

意 見

符合教學(xué)要求，同意。

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學(xué)后記（即教學(xué)實施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫)

血細(xì)胞Wright染色原理，紅細(xì)胞顯微鏡計數(shù)法原理是臨檢基礎(chǔ)中最基本的內(nèi)容，結(jié)合視頻與動畫，學(xué)生得到較好的理解，反映好。