水蛭的背部肌肉和腹直肌一樣，對乙酰膽堿（Ach)非常敏感，如用毒扁豆毒堿處理后，對乙酰膽堿的敏感性大增，此時(shí)乙酰膽堿的含量即使低到10-8M或以下，亦能使懸于5毫升浴槽中的肌肉收縮，因此適用于測定微量的的未知擬膽堿藥。亦適于測定刺激神經(jīng)（如貓頸上神經(jīng))后釋放的Ach量。
取水蛭一只，背位固定，分別釘住吸盤和尾吸盤，沿二條白線，由口向尾部剪開，去掉內(nèi)部臟器，釘住背肌的二邊，從中剪開成二個(gè)標(biāo)本，每一標(biāo)本二端穿線，上端連描記杠桿，下端固定在L形管上，放置在通以空氣的蛙任氏液中，浴槽為10毫升，最好5毫升。營養(yǎng)液維持室溫即行。實(shí)驗(yàn)前標(biāo)本應(yīng)穩(wěn)定3小時(shí)，在此期間，每15分鐘沖洗一次，其反應(yīng)較蛙腹直肌慢。先以Ach為對照。將Ach10-5M加入浴槽，觀察收縮反應(yīng)，然后找出引起合適反應(yīng)的劑量，選擇幾個(gè)劑量畫出對數(shù)劑量一反應(yīng)曲線。未知藥按上法實(shí)驗(yàn)，亦制作曲線以比較之。
