實驗動物科學:第十節(jié)　病毒學研究中實驗動物的選擇與應用

一、病毒學研究中實驗動物的選擇

病毒學研究常選用的實驗動物有金黃地鼠、小白鼠、豚鼠、家兔、綿羊、禽類、猴等。分離病毒廣泛使用的是乳鼠，它對柯薩基病毒、呼吸道腸道病毒和蟲媒病毒感染有高度易感性。許多柯薩基病毒A型直到目前仍然不能在1月齡小白鼠以外的任何非人的宿主中培養(yǎng)。因此，目前研究蟲媒病毒常選用小白鼠乳鼠及剛斷乳的幼鼠，A型柯薩基病毒需用出生一天內(nèi)的小白鼠培養(yǎng)。用感染乳鼠腦制備補體結(jié)合抗原，滴度常較高且非特異性僅應較少。

其他實驗動物，如成年小白鼠、兔、豚鼠、雪貂在人類病毒學的發(fā)展史上曾起過關鍵性作用，但目前它們主要用來研究病理機制、制備診斷用品等，并不用于分離病毒。靈長類動物廣泛用于致病性研究，特別是可能由“慢病毒”感染引起的一些疾病。

選用作病毒學研究的實驗動物，應首先考慮采用該病毒的易感動物。不同病毒的易感動物與接種途徑見表10-48。

表10-48　各種病毒常用易感動物與接種途徑

在進行腫瘤病毒研究時要注射選擇病毒的自然宿主和實驗宿主動物。因為病毒與腫瘤關系主要來源于實驗動物的研究，實驗動物的選擇很重要。動物腫瘤病毒因所含核酸不同而分為兩類，即RNA腫瘤病毒和DNA腫瘤病毒。RNA腫瘤病毒有三種電鏡形態(tài)，稱為A型、B型和C型。最常見的為C型顆粒。DNA病毒中，有多種能引起動物腫瘤。其大小不一，最大的病毒如痘病毒、皰疹病毒、傳染性軟疣病毒，最小的病毒如多瘤病毒。動物DNA、RNA腫瘤病毒的自然宿主和實驗宿主情況見表10-49和表10-50。

表10-49　動物RNA腫瘤病毒

表10-50　動物DAN腫瘤病毒

二、常見病毒敏感動物的選擇

病毒敏感動物的研究，一直是病毒學中的重要內(nèi)容之一。實驗動物在人類病毒學發(fā)展史上曾起過重要作用，主要用作分離病毒、研究發(fā)病機制、抗病毒藥物篩選、疫苗效果及完全性鑒定、制備診斷用品等。

實驗動物選擇，應注意影響動物實驗效果的各種因素。不同種屬動物對同一致病因素的易感性不同，對一種動物是病原體，對另一動物可能并不致病。即使是同一種屬動物的不同品系，對同一刺激的反應也有很大差異。年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康情況，往往導致對同一刺激的不同結(jié)果。此外，病毒學研究中，接種途徑的改變往往導致不同的感染結(jié)果。實驗中，應盡量利用經(jīng)微生物控制的動物和純種動物。

表10-51　各種病毒在雞胚內(nèi)的繁殖與接種途徑

（一)RNA病毒敏感動物

1．披蓋病毒科

⑴黃熱病毒：黃熱病毒是披蓋病毒科、黃熱病毒屬（B組蟲媒病毒)的原型。所有靈長類可能都易感，其中非洲種類抵抗力較高，只有隱性感染或很輕的非致死癥狀，而南美及西印度群島的猴敏感得多。最為敏感的動物是恒河猴，另外可用中國猴（Macacus　Sinicus)及斷尾猴（M.Speciosus　Thibetanus)。小白鼠對黃熱病毒也敏感，令人感興趣的是：純血清接種的小白鼠尚能很好存活，而以稀釋血清接種的小白鼠卻于較短時期內(nèi)死亡。這一奇特現(xiàn)象的理由，可能是由于病人體內(nèi)血清抗體早期出現(xiàn)之故。應用純血清時，這些抗體中和了病毒的作用，而當應用稀釋的血清時，抗體濃度不足，但病毒在稀釋后仍然具有活力。

⑵登革病毒：登革病毒屬披蓋病毒科中的黃病毒屬，小白鼠往往是經(jīng)常應用唯一實驗動物。有幾株病毒已對其適應，特別是對新生小白鼠。1～2日齡乳鼠和倉鼠腦內(nèi)注射病毒后死亡。病毒對小白鼠的適應過程如下：接種年齡2～3周的小白鼠，最好選用abc種，一部分小白鼠接受未經(jīng)稀釋的血清，另一部分則接受稀釋至1：100的血清，觀察5～6周，殺死明顯有麻痹或腦膜炎征象的小白鼠，以其腦組織制或懸液接種于其人它小白鼠。

猴對登革病毒易感，很多種獼猴，食蟹猴，長尾猿，狒狒都可因蚊蟲叮刺或注射病毒而受到感染�；�本是無癥狀的隱性感染，但接種后1～7天內(nèi)有病毒血癥，有人報告有輕度白細胞減少。

小雞、晰蜴、新生或成年豚鼠、兔、倉鼠或棉鼠實驗接種后不發(fā)生疾病。

個別報告稱腦內(nèi)或鼻腔內(nèi)接種可使日本黃鼠死亡，未能被證實。

⑶乙腦病毒：乙腦病毒屬于披蓋病毒科黃熱病毒屬的B組蟲蝶病毒。

實驗室內(nèi)，乳鼠和成年小鼠鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，腹腔內(nèi)接種后乳鼠發(fā)生致死性腦炎，只有幾種小鼠株的成年小鼠發(fā)生致死性腦炎。恒河猴、食蟹猴和成年倉鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，但周圍途徑接種時只發(fā)生無癥狀的病毒血癥。豚鼠和兔腦內(nèi)或周圍接種，蝙蝠、小雞、和蒼鷺周圍接種后都只發(fā)生無癥狀的病毒血癥。蝙蝠可保持感染，經(jīng)過冬眠后重新發(fā)生病毒血癥。

2．沙粒病毒科

⑴胡寧（Juinin)病毒：胡寧病毒是阿根延出血熱致病因子。屬子沙料病毒的Tacaribe復合群。

豚鼠實驗感染Junin病毒時產(chǎn)生類似人類阿根延出血熱的致死性疾病。接種后5～8天，感染的動物開始發(fā)熱，在11～15天體溫過低，休克而死亡。病毒血癥以及尿和唾液排出病毒一直到死。尸檢時采集的主要器官中都有病毒。

乳鼠實驗感染時產(chǎn)生典型的病毒性腦炎，死亡率為95～100%，成年小鼠有抵抗力。

⑵拉沙（Lassa)病毒：拉沙病毒屬于沙粒病毒科。新生小白鼠腦內(nèi)接種此病毒引起不顯性持續(xù)感染。成年小鼠腦內(nèi)接種后5-7天出現(xiàn)致死性疾病，有痙攣發(fā)作，最后后腿強直、呼吸停止。成年多乳鼠實驗感染為隱性感染。松鼠猴肌肉接種后，經(jīng)10-14天潛伏期，動物發(fā)生多變m.gydjdsj.org.cn/jianyan/的致死性疾病。豚鼠腹腔內(nèi)接種后，發(fā)生呼吸功能不全，約67%的動物死亡。

⑶淋巴細胞脈絡叢腦膜炎（LCM)病毒：本病毒與拉沙病毒，馬秋堡（Machupo)病毒同屬沙粒病毒屬，對小白鼠腦內(nèi)接種尤為敏感，可供分離病毒用，對猴及豚鼠有致病力。

應使用4周齡的小鼠及乳鼠、未斷乳豚鼠200-400g重的豚鼠�？赡軙r，采用“瑞士”Albinos種小鼠。飼養(yǎng)中，應確保無LCM病毒感染。為取得最好效果，一方面接種幼年動物，另一方面用年齡較長的。接種量如下：

6-8天齡乳鼠：腦內(nèi)接種0.03ml，腹腔接種0.2ml。

4周齡小鼠：腦內(nèi)接種0.03ml，腹腔接種0.25ml。

未斷乳的小鼠：腦內(nèi)接種0.05ml，腹腔接種1ml。

已斷乳的200-400g豚鼠，腦內(nèi)接種0.15ml，腹腔接種5ml。

不同接種途徑的感受性亦是不同的。腦內(nèi)接種感染而發(fā)病的鼠數(shù)（4周齡以上的)遠比經(jīng)腹腔內(nèi)接種者為多。經(jīng)腹腔接種者可不顯任何癥狀。豚鼠（250g以上)二種接種途徑的發(fā)病數(shù)大致相等（有進腦內(nèi)接種稍高些)，但這些資料并不對所有毒株適用。

小白鼠感染后表現(xiàn)多變，可能有三種過程：⑴急性疾病并死亡；⑵急性急病，恢復并產(chǎn)生抗體；⑶形成持久的耐受性感染，攜帶病毒，不產(chǎn)生抗體。決定因素有：⑴感染的病毒株；⑵接種途徑（最為重要)；⑶動物感染時的年齡。

產(chǎn)生急性疾病的動物一般在感染后4-7天出現(xiàn)體征。表現(xiàn)為：弓背、豎毛、嗜睡、眼瞼炎、頭部水腫等。

3．小RNA病毒科

⑴脊髓灰質(zhì)炎病毒：脊髓灰質(zhì)炎病毒是小核糖核酸（RNA)病毒科、腸道病毒屬的一種。1908年Landsteiner和Popper成功的把此病毒傳播于猴。在后來的40年里證明了亞人類靈長類能經(jīng)消化道感染，有些株能適應于實驗室的嚙齒類。

猴子：在此屬內(nèi)，猩猩能感染和人類完全相似的疾病。但此類動物不易常備。實際工作中，各種不同的獼猴對本病來說是猿類中最為優(yōu)良的品種，特別是Macacus　Rhesus。長尾猴類以及狒狒類對脊髓灰質(zhì)病毒亦有感受性，唯敏感性遠較獼猴為差。接種方法很多，腦內(nèi)注射未必是最佳的，可用：腹腔注射、坐骨神經(jīng)附近的深部肌肉注射、鼻腔滴注。實驗操作中最好以不同方法混合接種。

嚙齒動物：病毒在應用嚙齒動物前，常需經(jīng)猿子適用1-2代。嚙齒動物（棉鼠、小白鼠、田鼠、鼷鼠)可經(jīng)腦內(nèi)接種，最好選用年幼動物、2-3周齡的小白鼠或15天齡的棉鼠。動物常于12-25天出現(xiàn)麻痹。

⑵柯薩基（Coxsackie)病毒：柯薩基病毒屬小RNA病毒科腸道病毒屬。根據(jù)本病毒對乳鼠的致病情況將其分為兩組：A組：產(chǎn)生彌漫性肌炎伴有隨意肌纖維的急性炎癥及壞死。B組：主要引起大腦局部退行性變等。

柯薩基病毒常用的傳代和分離方法，是乳鼠腦內(nèi)、腹腔內(nèi)或皮下接種。4-5日齡的小鼠對A組病毒的感染仍然敏感。但B組病毒在1日齡或更小的小鼠繁殖最好。即使是成鼠，給予注射可的松、X線照射或感染期間持續(xù)暴露于寒冷（4℃，B組病毒)或嚴重營養(yǎng)不良都可使其對柯薩基病毒易感。通常乳鼠在癥狀出現(xiàn)后24小時內(nèi)死亡。除乳鼠外亦可用3周齡以內(nèi)的鼷鼠（Merion)，它有固定的感受性，可用以分離及傳代。恒河猴腦內(nèi)接種A₇和A₁₄病毒引起中樞神經(jīng)系的神經(jīng)節(jié)細胞廣泛變性，進而導致松弛性麻痹。

4．布尼雅病毒科

腎綜合癥出血熱病毒（HFRSV)屬于布尼雅病毒科、布尼雅病毒屬，其敏感動物詳述于后。

5．正粘病毒科

流感病毒：屬于正粘液病毒屬。動物模型最好用雪貂，也可用小白鼠、金黃地鼠、豚鼠、猴及豬。

雪貂：是較為理想的交流感動物模型。白色皮毛的雪貂似較雜色雪貂為敏感。病理材料經(jīng)鼻腔內(nèi)接種。雪貂對甲、乙型流感均易感，病毒不經(jīng)適應即能對雪貂致病，并易傳播給其它雪貂和人。其臨床表現(xiàn)與人相似，發(fā)熱，并伴上呼吸道感染。愈后血清中產(chǎn)生高滴度抗體。

小白鼠：對流感病毒敏感。但其癥狀與人不同，主要表現(xiàn)為下呼吸道感染，并死于肺炎。直接取自患者的材料不宜于小白鼠分離病毒。適用的方法是：有毒材料應①在乙醚麻醉下通過鼻腔接種，②先在雪貂身上適應。

金黃地鼠：地鼠對研究流感溫度敏感變異株很有用處。地鼠為隱性感染，但可在鼻、肺部測出病毒繁殖量。有利之處是：其體溫和鼻部溫度與人的相似。對人毒不同的流感病毒溫度變異株，在地鼠機體也表現(xiàn)出相似的差異。

6．副粘病毒科

⑴麻疹病毒：除靈長類外，一般動物均不易感。1911年首次成功地傳給獼猴。以后證明，除了接觸和吸入外，其它種類的猴，如：猿類、恒河猴、崇猴、爪哇猴、倭猴等，對各種不同接種途徑也易感。其癥狀類似人類麻疹。潛伏期為3-22天，病毒血癥期為4-15天，約一半動物有皮疹、結(jié)膜炎、卡它和發(fā)熱。

適應在組織培養(yǎng)上的病毒可在乳腺或乳地鼠體內(nèi)繁殖，腦內(nèi)接種可引起腦膜炎癥。

⑵呼吸道合胞病毒：猩猩感染后可產(chǎn)生與人一樣的上呼吸道臨床癥狀。

猴，Cebus猴感染本病毒后，可引起肺炎。在肺和支氣管都可以找到呼吸道合胞病毒抗原。Cebus猴感染后4-6天，病毒繁殖方可達高峰，并出現(xiàn)臨床癥狀。

雪貂年齡愈小，病毒繁殖量愈大。3日齡雪貂，鼻內(nèi)感染時其肺部病毒量可達105PFV/g肺組織，7-14齡雪貂，肺病毒量僅103-104PFV/g肺組織；28日齡的雪貂，其肺內(nèi)測不出病毒繁殖量。

此外，地鼠和棉鼠對呼吸道合胞病毒較敏感，感染后，在其細支氣管及肺可以找到呼吸道合胞病毒。

7．彈狀病毒科

狂犬病毒（Rabies　Virus)：1987年Galfiev　首先用家兔作為實驗動物，進行了傳統(tǒng)的實驗，在該實驗中，巴斯德培育了對犬致病力減弱而對家兔具有固定潛伏期的病毒。

為了建立實驗室感染，常選用：中國地鼠、小白鼠、豚鼠和兔（按敏感性程度排列)。顱內(nèi)接種比皮下或肌肉注射更可靠。

小白鼠的狂犬病毒伏期一般為8-14天，很少超過20天。表現(xiàn)為豎毛、弓背、活躍興奮或淡漠無力，進而戰(zhàn)栗，后肢癱瘓，死亡。

家兔：初始癥狀為瞳孔擴張，數(shù)小時后呼吸困難、癱瘓，潛伏期一般為12-25天。

豚鼠：潛伏期比家兔短，當發(fā)生癥狀后，常有興奮期，此時，動物變得兇暴，最后癱瘓。

（二)常見DNA病毒的敏感動物

1．痘病毒科

天花病毒：猴及家兔均敏感。應選用雄兔作皮膚劃痕接種、角膜劃痕接種、睪丸內(nèi)接種。猴子則在脅腹部皮膚上作劃痕接種，如系雄猴則同時作睪丸內(nèi)接種。感染后兔皮膚上出現(xiàn)明顯的皮疹，局限于皮膚劃痕處；角膜炎性輕微或缺如，無睪丸炎。猴沿皮膚劃痕出現(xiàn)典型皮疹，如做睪丸內(nèi)接種，則有睪丸炎發(fā)生。

2．疹病毒科

⑴單純皰疹病毒（HSV)：家兔為最適宜的動物，豚鼠、小白鼠、地鼠亦可用。用家兔及豚鼠的原因之一，是因為可以用有菌材料做角膜接種而可不加抗菌素或過濾，不妨礙病毒生長。

家兔角膜途徑接種：導致角膜結(jié)合膜炎。腦內(nèi)途徑接種：出現(xiàn)腦炎癥狀，最后死亡。

豚鼠角膜接種：病損如家兔。腦內(nèi)接種：有發(fā)熱，偶而有腦炎癥狀。

皮膚接種：最好在足蹠皮內(nèi)作劃痕，皮膚可出現(xiàn)皮疹，最后可能死亡。

小白鼠：最好用新生小鼠。經(jīng)腦內(nèi)或腹腔接種。動物呈腦炎癥狀，最后死亡。亦可同時接種一批“病毒－抗皰疹標準血清”混合液，以觀察第一批動物死亡及第二批動物存活情況，以簽定病毒。

⑵水痘一帶狀痘疹病毒（VZV)、巨細胞病毒：還未發(fā)現(xiàn)有實驗動物對這兩種病毒敏感。

（三)未分類病毒的敏感動物

1．m.gydjdsj.org.cn甲型肝為病毒（HAV)

1967年Deinhardt等首次證明HAV可在狨猴體內(nèi)增殖，此后Mascoli等從狨猴體內(nèi)發(fā)現(xiàn)人類HAVCR326株。

狨猴、黑猩猩、紅面猴對HAV均易感，經(jīng)口或靜脈注射接種病毒后，可產(chǎn)生肝炎。

肝組織呈現(xiàn)肝炎的病理改變。細胞漿內(nèi)查到HAV抗原，恢復期血清中檢測出相應抗體，糞便中可排出HAV顆粒。

2．乙型肝炎病毒（HBV)

黑猩猩是HBV的易感動物。狨猴雖可感染但不如前者敏感。因此用黑猩猩研究HBV的發(fā)病機理、檢測自動免疫、被動免疫的效果以及HBV疫苗的安全性。

目前為止，各種病毒敏感動物的研究。仍然是病毒學中引人矚目的的領域，因為在不同病毒疾病發(fā)病機制的研究、抗病毒藥物篩選、疫苗效果及安全性鑒定等方面，動物模型都有其獨特的優(yōu)越性。但就病毒分離而方，使用組織培養(yǎng)的方法，對于某些病毒更為方便。不同實驗室可根據(jù)其實驗目的、動物來源情況等，選擇不同的敏感動物。

三、HFRS動物模型的研究和應用

腎綜合征出血熱病毒（HFRSV)，屬布尼亞病毒科（Bungavividae)中的一個新屬，稱為漢坦病毒屬。自1978年南朝鮮李鎬汪首次以疫區(qū)黑線姬鼠肺分離到HFRSV（亦稱漢坦病毒Hantaan　Virus,HTNV)后，對其動物模型進行了眾多的研究。

（一)HFRS感染動物模型

感染動物模型的亞臨床感染，亦無明顯病理變化，主要用于病毒分離和傳代。目前有：非疫區(qū)黑線姬鼠、大白鼠、長爪沙鼠、家兔等。

1．黑線姬鼠

非疫區(qū)黑線姬鼠是最早用于病毒分離和實驗研究的動物。據(jù)報道用各種途徑（肌肉、皮下、肺內(nèi)、鼻內(nèi)、或經(jīng)口)接種均可使黑線姬鼠感染。皮下和肺內(nèi)接種0.1ml漢坦病毒或待檢其其它材料后，10天左右肺部出現(xiàn)病毒，以后在腎、肝、頜下腺中可檢出病毒。約接種后20天，肺中病毒滴度最高，以后逐漸下降，但150天后仍可檢出。

黑線姬鼠為野生鼠類，常有野生嚙齒類病毒的污染，加之來源、人工飼養(yǎng)、繁殖等問題較難解決，因而使用受到一定限制。

2．大鼠成鼠

1981年Leepw等將朝鮮出血熱病毒接種到雌性、1月齡Wistar和Fisher大鼠。這是首次將該病毒接種于實驗大鼠，肌肉接種0.5ml漢坦病毒后14-65天，肺內(nèi)可發(fā)現(xiàn)其特異性抗原；接種后三周，血清中可檢出特異性抗體，除脾臟亦可查到特異抗原外，與黑線姬鼠臟器的抗原分布相同。

朝鮮出血熱病毒對實驗室大鼠的適應，提供了無野生嚙齒類病毒污染的實驗模型�，F(xiàn)已應用于特異性藥物治療研究。

3．長爪沙鼠成鼠

1983年朱智勇等發(fā)現(xiàn)長爪沙鼠對HFRSV敏感。六種途徑（肺內(nèi)、皮下、腹腔、口腔、肌肉)接種，第1代即可感染，無需傳代適應；臟器內(nèi)檢出特異性熒光部位與黑線姬鼠相同。接種病毒后4天，肺組織中查見病毒抗原，5-7天過高峰，通常于10-14天消失。接種后8天，查到抗體，14天達高峰。長爪沙鼠可用多種宿主動物體內(nèi)HFRSV的分離，且在較短時間內(nèi)即可獲得毒株。而且，這些毒株可用于疫苗的研制。

4．家兔

HFRSV感染的家兔，與長爪沙鼠成鼠一樣，亦為無癥狀短期自限性隱性感染。不同來源的HFRSV，除口飼外，肌肉、腹腔、肺內(nèi)、皮下接種均可使家兔感染，并能在體內(nèi)連續(xù)穩(wěn)定地傳代，但不表現(xiàn)任何癥狀。接種后4天，有持續(xù)數(shù)天的病毒血癥，7-14天可在多種器官內(nèi)找到病毒抗原，以脾、小腸、胰腺中為明顯，肺、肝、腎等組織內(nèi)偶爾可見，8-9天抗原量最多，同時在血液中開始查到相應抗體，隨抗體效價增長體內(nèi)病毒抗原很快減弱，至第15天完全消失。

初步實驗表明，R3和76/118株都能使乳兔感染，其表現(xiàn)與成兔相似，全身多種臟器組織內(nèi)可檢出病毒抗原，但其熒光亮度更強，提示乳兔對HFRSV更敏感。

（二)HFRS致病動物模型

致病動物模型為顯性感性甚至死亡，并伴有明顯病理改變。主要用于發(fā)病機理研究、藥物篩選等。目前有小白鼠乳鼠、大鼠乳鼠、裸鼠及環(huán)磷酰胺處理的金黃地鼠。

1．小鼠乳鼠

Tasi等報道了第一個致病動物模型，即新生小白鼠（2-4齡)。相繼發(fā)現(xiàn)CD-1、ICR、Balb/等品系乳鼠均對HFRSV敏感。顱內(nèi)、腹腔、肌肉、皮下接種均可使其感染。我們的研究發(fā)現(xiàn)：顱內(nèi)、腹腔聯(lián)合接種與單純顱內(nèi)接種，在發(fā)病時間、抗原分布上無明顯差別。但腹腔接種乳鼠發(fā)病時間要比腦腹聯(lián)合接種及單純腦內(nèi)接種平均遲4-5天。病毒抗原廣泛分布各臟器（腦、心、肝、脾、肺、腎、胸腺)，腦內(nèi)接種0.02ml經(jīng)乳鼠傳代適應的漢坦病毒76/118株（LD50、10-6·5/0.02ml)，乳鼠第7天開始發(fā)病，表現(xiàn)為蜷縮、活動減少、聳毛、弓背、尾強直、后肢麻痹，直致死亡，發(fā)病規(guī)律。

乳鼠現(xiàn)已成功地用于病毒分離、繁殖高滴度HFRSV，并被用于研究不同來源毒株的毒力及測定疫苗效力和安全性、篩選抗病毒藥物及研究發(fā)病原理。

2．大鼠乳鼠

Fishet大鼠（E344/N)出生后24小時內(nèi)，分別顱內(nèi)接種HFRSV76/118株和B-1株（分離自實驗室大鼠)，死亡率分別為18.8%、42.9％。腹腔分別接種上述兩種毒株，觀察至第50天，仍未見死亡。

3．金黃地鼠

每只地鼠腹腔一次注射200mg/kg環(huán)磷酰胺，48小時后，腹腔或皮下注射病毒懸液1ml，或腦內(nèi)接種0.05ml。絕大多數(shù)動物在感染后7-9天病死。在病死地鼠的各器官均發(fā)現(xiàn)有HFRS病毒抗原，并分離到病毒。各器官的病理變化酷似人體出血熱病變。

4．裸鼠

14-42天齡的CK-1無胸腺裸鼠，腦內(nèi)接種104·4PFU（0.02ml)漢坦病毒76/118株后40天，表現(xiàn)有體重減輕、活動減少、站立不穩(wěn)、嗜睡等，最后全部死亡。而其同齡同窩兔功能正常鼠不發(fā)病。

我們用乳鼠適應的漢坦病毒76/118株感染了21日齡NIH品系的無胸腺裸鼠，感染劑量2.5×10⁵LD₅₀，（腦腹聯(lián)合接種，0.02ml/腦，0.05ml/腹)。最早于第8天開始發(fā)病，表現(xiàn)為活動減少、互相抱團、食欲減退、體重減少、弓背、后肢麻痹，于20天內(nèi)全部死亡。而接種相同量病毒的同窩免疫功能正常鼠則不發(fā)病。腦、心、肝、脾、肺、腎均有特異抗原，腦內(nèi)抗原熒光最亮。初步觀察了人白細胞干擾素對裸鼠感染的保護作用，劑量為：20×10⁶μ/kg，腹腔內(nèi)給藥，自病毒感染當天開始，連續(xù)用藥6天，發(fā)現(xiàn)治療組比對照組存活時間延長1.5-3天，進一步的研究正在進行中。

（三)靈長類和樹鼩

靈長類的研究尚無肯定的結(jié)果。

非洲綠猴、腦內(nèi)接種HFRSV后，觀察7周，未見臨床癥狀及病理變化。Amyx等發(fā)現(xiàn)獼猴和黑猩猩接種后，可有規(guī)律地出現(xiàn)短暫蛋白尿、病毒血癥，偶見痰質(zhì)血癥。在日本，用HFRS病毒接種幼齡獼猴（Ｃynomolgus)后７周，可見有與HFRS病人相似的病理變化：腎、肺、脾、心臟和肝可見毛細血管擴張、部分臟器可見彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC)、腎髓質(zhì)集合管退行性變、感染3-4周有蛋白尿，并在組織中檢出抗原，但未觀察到臨床癥狀。看來獼猴可能有希望做為較好的致病研究模型。

國內(nèi)未志勇等將R₃株病毒接種三只恒河猴（3～4歲)，研究HFRS病毒在猴體內(nèi)的分布、增殖和排出，研究結(jié)果表明，接種病毒后3～5天即出現(xiàn)病毒血癥，直至血液中檢出抗體前2天止，持續(xù)8天之久；猴產(chǎn)生抗HFRS抗體時間在接種后第14天，且IgG和IgM抗體同時出現(xiàn)；病毒血癥期直至產(chǎn)生抗體上，猴體內(nèi)各器官組織未發(fā)現(xiàn)病毒增殖。此時糞便和尿都未分離出HFRS病毒。從而可推測HFRS病毒在猴體內(nèi)增殖的部位可能是循環(huán)血細胞內(nèi)，這與近年來證明該病毒在病人血細胞內(nèi)增殖相符。

最近嚴玉辰等將A16株病毒接種于六只樹鼩，每只由皮下和腦內(nèi)混合接種10^-1病毒懸液1ml。結(jié)果：1～2號樹鼩于接種后7天死亡，經(jīng)檢測臟器抗原皆陰性，死后查血清抗體陽性。3～6號樹鼩接種病毒后，經(jīng)2～4次尿抗體檢查均陰性，血清抗體皆陽性。接種病毒7天后，均有不同程度的體溫增高現(xiàn)象。其中5號樹鼩于接種病毒在9天死亡�？乖�在樹鼩臟器組織中的分布頗為廣泛，但1～2號小獸血中有抗體，臟器內(nèi)未檢出抗原，何種原因尚待研究。初步看來此種小獸對HFRS病毒較敏感，但非理想的敏感動物。其不同年齡、不同毒株、不同劑量的實驗，有待進一步深入研究。（本節(jié)常見病毒敏感動物的選擇資料由王晶翼同志提供)。