鉤端螺旋體是一大類菌體纖細(xì)、螺旋致密,一端或兩端彎曲呈鉤狀的螺旋體,簡稱鉤體。其中大部分營腐生生活,廣泛分布于各種水生環(huán)境中,無致病性。一小部分為寄生性和致病性的螺旋體,可引起人和動物的細(xì)螺旋體病。
(一)生物學(xué)特性
1.形態(tài)結(jié)構(gòu)與染色特性
菌體呈纖細(xì)的圓柱形,長6-20μm,寬0.1-0.2μm,螺旋弧度0.2-0.3μm,至少有18個彎曲、細(xì)密、規(guī)則的螺旋,菌體一端或兩端彎曲呈鉤狀。
其運動形式多樣,能翻轉(zhuǎn)和屈曲運動,也可沿其長軸旋轉(zhuǎn)而快速前進(jìn)。用暗視野顯微鏡較易觀察其形態(tài)和運動力。
細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)與革蘭氏陰性桿菌相似醫(yī),學(xué).全,在.線m.gydjdsj.org.cn。外膜位于原生質(zhì)柱和軸絲外層,相當(dāng)于細(xì)菌莢膜。
革蘭氏染色陰性,但較難著色。鍍銀染色法和剛果紅負(fù)染效果較好。
2.培養(yǎng)特性
需氧,對營養(yǎng)要求不高,較易在人工培養(yǎng)基上生長。在含滅活的新鮮兔血清和蛋白胨的培養(yǎng)基上生長良好。最適pH為7.2~7.4,最適生長溫度為28~30℃。某些菌株能產(chǎn)生溶血素。
3.抵抗力
在酸堿度為中性濕土和水中可存活數(shù)月,因此該病主要經(jīng)水源傳播。對熱和酸堿環(huán)境抵抗力弱,45℃30min,50℃10min,60℃10s即可將其殺死。4℃冰箱中可存活1~2周,-70℃可保存2年多。對各種化學(xué)消毒劑和青霉素、金霉素、四環(huán)素等抗生素敏感性。
4.抗原
抗原分兩種,表面抗原(P抗原),為多糖蛋白質(zhì)復(fù)合物,具有型特異性。內(nèi)部抗原(共同抗原,S抗原),系類脂多糖復(fù)合物,具有屬特異性。
5.毒力因子
本病是一種動物源性的人畜共患傳染病。毒力因子主要有:吸附物質(zhì)、溶血素、內(nèi)毒素樣物質(zhì)、細(xì)胞毒性因子。
(二)致病性
鉤體可感染大部分哺乳動物和人。我國已從50多種動物檢出鉤體,其中鼠類和豬是鉤體的主要貯存宿主和傳染來源,帶菌率高,排菌期長醫(yī)學(xué)全在,線m.gydjdsj.org.cn。多數(shù)家畜呈隱性感染,但鉤體在腎臟內(nèi)長期繁殖,并隨尿不斷排出,污染土壤、水源等外環(huán)境,人和家畜通過直接或間接地接觸污染源而被感染。
家畜中以牛和羊?qū)︺^體的易感性最高,其次為馬、豬、犬、水牛和驢等,許多野生動物,特別是鼠類易感。急性病例的主要癥狀為發(fā)熱、貧血、黃疸、出血、血紅素尿及黏膜和皮膚壞死;亞急性病例可表現(xiàn)為肝炎、腎炎、腦膜炎及產(chǎn)后泌乳缺乏癥;慢性病例則表現(xiàn)虹膜睫狀體炎、流產(chǎn)、死產(chǎn)及不育或不孕。
(三)微生物學(xué)診斷
發(fā)病7-8d內(nèi)(菌血癥、發(fā)熱期)可采集血、腦脊髓液,剖撿可取肝和腎;發(fā)病7-8d后(退熱、菌尿癥期)可采集尿液,死后采腎,用于微生物學(xué)檢查。
1.直接鏡檢
(1)暗視野活菌檢查:將病料差速離心集菌后,制壓滴標(biāo)本片鏡檢。如在暗視野中見有鉤體菌的典型形態(tài)與運動方式,即可確認(rèn)為鉤體。
(2)染色鏡檢:多用改良鍍銀法和媒染法醫(yī),學(xué).全,在.線m.gydjdsj.org.cn。前者使鉤體呈深黑色或灰色。后者,鉤體呈紫紅色。姬姆薩染色片中鉤體呈紫色。
2.分離培養(yǎng)用于鉤端螺旋體的培養(yǎng)基很多,常用的有柯氏培養(yǎng)基、弗氏培養(yǎng)基等。病料接種后,置28-30℃溫箱內(nèi)培養(yǎng),每5-7d觀察鉤體生長情況并取樣鏡檢。
3.動物接種試驗體重150-200g幼齡豚鼠或50-60g金黃倉鼠,常用于病料內(nèi)鉤體的分離及菌株毒力測定。一般在接種后1-2周動物出現(xiàn)體溫升高和體重減輕,此時即可剖檢,取其腎和肝進(jìn)行鏡檢和分離培養(yǎng)。主要病變?yōu)閮?nèi)臟出血和皮下出血、黃染。
4.血清學(xué)檢查鉤體病的血清學(xué)檢測方法較多,常用的有以下幾種。
(1)顯微凝集溶解試驗有高度型特異性,既是診斷鉤體病最常用的方法之一,又是鉤體分型的主要方法。
(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)敏感性高于顯微凝集溶解試驗,多用于鉤體病的早期診斷,具有特異、敏感、快速的優(yōu)點。
(3)SPA協(xié)同凝集試驗用于鉤體菌株鑒定、分型、抗原變異等的研究。
此外,還有補體結(jié)合試驗、間接血凝試驗等,以及核酸探針、PCR技術(shù)等。