白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法
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公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1493687A
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公開(kāi)(公告)日
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2004.05.05
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03152968.2
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申請(qǐng)日期
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2003.09.05
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專利名稱
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白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法
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主分類號(hào)
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C12N5/08
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分類號(hào)
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C12N5/08;C12N15/79
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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田志剛;張建;魏海明;張建華;;孫汭
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地址
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230026安徽省合肥市金寨路96號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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合肥華信專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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余成俊
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國(guó)省代碼
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安徽;34
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主權(quán)項(xiàng)
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白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株，其表型為CD56強(qiáng)陽(yáng)性，CD16和CD3均為陰性，其特征在于形態(tài)為分散的、半貼壁生長(zhǎng)狀態(tài)。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種白細(xì)胞介素-15基因修飾的自然殺傷細(xì)胞株及其制備方法，該細(xì)胞株表型為CD56強(qiáng)陽(yáng)性，CD16和CD3均為陰性，其形態(tài)為分散的、半貼壁生長(zhǎng)狀態(tài)。其制備方法，是將IL-15的cDNA編碼區(qū)插入pcDNA3真核表達(dá)載體，構(gòu)建分泌型重組真核表達(dá)載體pcDNA3/IL-15；利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染NK-92細(xì)胞；在篩選培養(yǎng)基中加入Geneticin(G418)進(jìn)行篩選；有限稀釋克隆化細(xì)胞，以IL-15的依賴細(xì)胞株測(cè)定克隆細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-15的活性，從中挑選出表達(dá)IL-15的陽(yáng)性細(xì)胞克�。粚⒃摽寺≡�20～100活性單位的IL-15的完全α-MEM培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增，得到具有臨床應(yīng)用價(jià)值的工程細(xì)胞株。適于臨床用于過(guò)繼免疫治療腫瘤。
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國(guó)際公布
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評(píng)論加載中...
