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由細胞周期蛋白D1超量表達介導的真核細胞中所需蛋白的超量表達

公開(公告)號 CN1151263C  
公開(公告)日 2004.05.26  
申請(專利)號 CN99811899.0  
申請日期 1999.08.11  
專利名稱 由細胞周期蛋白D1超量表達介導的真核細胞中所需蛋白的超量表達  
主分類號 C12N15/67  
分類號 C12N15/67;C12N5/10;//C07K14/47  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.8.11 US 60/096,086; 1999.8.10 US 09/371309  
申請(專利權(quán))人 安姆根有限公司  
發(fā)明(設計)人 胡小芬;J·M·古達斯  
地址 美國加利福尼亞州  
頒證日 2004.05.26  
國際申請 PCT/US1999/018213 1999.8.11  
進入國家日期 2001.04.09  
專利代理機構(gòu) 中國專利代理(香港)有限公司  
代理人 邰紅  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項 哺乳動物細胞,包含:a)細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的插入基因構(gòu)建物,其中所述細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物在細胞中被功能性地表達,其表達水平高于所述細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物在插入前細胞中的表達水平;和b)目的蛋白的插入基因構(gòu)建物,其中所述目的蛋白在所述細胞中被表達,其表達水平高于所述目的蛋白在插入前細胞中的表達水平。  
摘要 本發(fā)明涉及用于蛋白表達的真核細胞,所述真核細胞包含:(a)編碼細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的插入的核酸片段和(b)編碼目的蛋白的插入的核酸片段,其中所述細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物和所述目的蛋白在所述細胞中被表達。本發(fā)明還涉及生產(chǎn)目的蛋白的方法,所述方法包括(a)將編碼細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物的核酸和編碼目的蛋白的核酸插入到真核細胞中;和(b)在允許表達所述目的蛋白的條件下培養(yǎng)所述細胞;和(c)分離所述目的蛋白。所述細胞最好是哺乳動物細胞,而CHO細為最優(yōu)選的。所述細胞周期蛋白D基因產(chǎn)物最好是人源的。合適的目的蛋白包括促紅細胞生成素(EPO)、骨原細胞生成素(OPG)、OPG-Fc、leptin、Fc-leptin和新紅細胞發(fā)生刺激蛋白(NESP)。  
國際公布 WO2000/009714 英 2000.2.24  
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