| 公開(公告)號 | CN1597951A |
| 公開(公告)日 | 2005.03.23 |
| 申請(專利)號 | CN200410012544.6 |
| 申請日期 | 2004.09.22 |
| 專利名稱 | 一種人工合成的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因-rBmK CTa |
| 主分類號 | C12N15/12 |
| 分類號 | C12N15/12;C07H21/00;C12N15/11;C07K1/14;C12N15/63;C12N15/70;A61K38/16 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 山西大學 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 梁愛華;付月君;王偉;柴寶峰;張志云 |
| 地址 | 030006山西省太原市塢城路36號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 山西五維專利事務所有限公司 |
| 代理人 | 楊耀田 |
| 國省代碼 | 山西;14 |
| 主權(quán)項 | 一種改良的蝎氯離子通道神經(jīng)毒素基因rBmKCTa，其核苷酸序列為：ATGTGCGGTCCGTGCTTCACTACTGACGCTAACATGGCTAGAAAATGCAGAGAATGCTGTGGTGGTATCGGTAAATGCTTCGGTCCGCAGTGCCTGTGCAACCGTATCTGA |
| 摘要 | 依據(jù)大腸桿菌偏愛密碼子的原則，將天然蝎氯離子通道神經(jīng)毒素BmK CT基因進行24個位點的突變，設(shè)計了適合在大腸桿菌BL21(DE3)中表達的DNA序列，采用PCR技術(shù)完成了重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素rBmK CTa基因的人工合成。在此基礎(chǔ)上，將此基因克隆到pExSecI表達系統(tǒng)中，轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)中，篩選得到高效表達的菌株，SDS-PAGE電泳檢測到該基因的表達產(chǎn)物占全菌蛋白的19.936％。經(jīng)親和層析，得到較純的具有生物學活性的蛋白，從一升培養(yǎng)液中可純化得到2.4 mg蛋白。采用本基因工程所得的改良的重組蝎氯離子通道神經(jīng)毒素對神經(jīng)膠質(zhì)細胞具有抑制作用，可用于制備通過抑制神經(jīng)膠質(zhì)細胞可以治療的疾病的藥物，也可用于蝎神經(jīng)毒素空間結(jié)構(gòu)及藥理學活性等研究。 |
| 國際公布 |
