公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1202243C
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公開(kāi)(公告)日
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2005.05.18
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN01126818.2
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申請(qǐng)日期
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2001.09.20
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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一種人肝癌細(xì)胞系
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N5/08
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分類(lèi)號(hào)
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C12N5/08
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李雁;湯釗猷
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地址
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200032 上海市醫(yī)學(xué)院路136號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專(zhuān)利代理有限公司
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代理人
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吳桂琴
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人肝癌細(xì)胞系,其特征是來(lái)源于裸鼠肺轉(zhuǎn)移灶,接種于裸小鼠皮下即可發(fā)生100%肺轉(zhuǎn)移,所述細(xì)胞系是通過(guò)連續(xù)裸鼠肺轉(zhuǎn)移篩選建立,具體步驟是:(1)第一輪裸鼠肺轉(zhuǎn)移篩選,MHCC97-H細(xì)胞接種于裸鼠皮下,成瘤后,原位接種皮下瘤小塊于裸鼠肝臟,裸鼠衰竭后,取出肺轉(zhuǎn)移灶復(fù)種于裸鼠皮下擴(kuò)增成瘤,(2)第二輪裸鼠肺轉(zhuǎn)移篩選,取上述裸鼠皮下瘤復(fù)種于裸鼠肝臟,方法同前,(3)第三輪裸鼠肺轉(zhuǎn)移篩選,取第二輪裸鼠肺轉(zhuǎn)移篩選的皮下瘤,重復(fù)上述過(guò)程,(4)細(xì)胞培養(yǎng)建系,取第三輪肺轉(zhuǎn)移灶皮下擴(kuò)增瘤進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)液為含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件:37℃,5%CO2/95%空氣,飽和濕度,隔天更換培養(yǎng)液,每5天傳代一次。
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摘要
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本發(fā)明屬于微生物動(dòng)物細(xì)胞系領(lǐng)域,具體涉及從肺轉(zhuǎn)移灶中建立有轉(zhuǎn)移表型的人肝癌細(xì)胞系,本發(fā)明采用裸鼠肺轉(zhuǎn)移灶瘤,通過(guò)裸鼠體內(nèi)連續(xù)肺轉(zhuǎn)移法篩選獲得具備特殊轉(zhuǎn)移表型、皮下接種即發(fā)生高度肺轉(zhuǎn)移的人肝癌細(xì)胞系HCCLM3,本發(fā)明對(duì)深入研究肝癌肺轉(zhuǎn)移的機(jī)理和防治肺轉(zhuǎn)移提供了適宜的實(shí)驗(yàn)材料。
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國(guó)際公布
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