| 公開(公告)號(hào) | CN1194094C |
| 公開(公告)日 | 2005.03.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN03113968.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.03.21 |
| 專利名稱 | 酵母菌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)人卵透明帶ZP3蛋白的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/81 |
| 分類號(hào) | C12N15/81;C07K14/435 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 暨南大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 謝琪璇;潘善培 |
| 地址 | 510632 廣東省廣州市天河區(qū)黃埔大道西601號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 |
| 代理人 | 王東亮 |
| 國(guó)省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種酵母菌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)人卵透明帶ZP3蛋白的方法，采用受體菌GS115、目的蛋白基因及載體質(zhì)粒、線性化酶等；包括的步驟有擴(kuò)增目的蛋白的基因片段、重組質(zhì)粒的構(gòu)建、重組質(zhì)粒的篩選和鑒定、重組質(zhì)粒導(dǎo)入Pichiapastoris表達(dá)系統(tǒng)、重組子(工程菌)的篩選、重組蛋白的表達(dá)、重組蛋白的純化，其特征是：所述目的蛋白基因是23～408位氨基酸的基因片段；所述的載體質(zhì)粒是pPIC9k；所述重組質(zhì)粒構(gòu)建時(shí)，插入該載體質(zhì)粒的ZP3目的基因片段是在前面引入了6個(gè)組氨酸序列的ZP323～408位氨基酸序列的基因片段；所述的重組質(zhì)粒導(dǎo)入前，先將重組質(zhì)粒用SacI酶進(jìn)行線性化，然后從酵母基因組的AoxI基因處插入。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種酵母菌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)人卵透明帶ZP3蛋白的方法，載體質(zhì)粒為pPIC9k，目的蛋白選用了23～408位氨基酸，串聯(lián)組氨酸序列片段連在目的蛋白的N末端，導(dǎo)入前采用SacI酶對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行線性化。表達(dá)生成的ZP3蛋白分泌及溶解性好，便于應(yīng)用。 |
| 國(guó)際公布 |
