| 公開(公告)號 | CN1310677C |
| 公開(公告)日 | 2007.04.18 |
| 申請(專利)號 | CN200410039540.7 |
| 申請日期 | 2004.02.05 |
| 專利名稱 | 一種利用腺病毒載體表達(dá)狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法 |
| 主分類號 | A61K39/205(2006.01)I |
| 分類號 | A61K39/205(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 柳紀(jì)省;殷相平;白銀梅;胡永浩;李志勇;張興旺;王 輝;蘭 喜;李寶玉;劉兆弼 |
| 地址 | 730046甘肅省蘭州市鹽場堡徐家坪11號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京金信立方知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 王鴻謀 |
| 國省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種利用腺病毒載體表達(dá)狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法，其特征是它包括如下過程：一、制備目的基因：設(shè)計(jì)引物，通過PCR的方法擴(kuò)增出狂犬病病毒抗原蛋白G基因與N基因；二、構(gòu)建重組復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體：將所述的抗原蛋白G基因與N基因插入到復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體特異性啟動子和終止子之間，構(gòu)建成含有融合基因G+N的重組復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV/G+N；三、獲得復(fù)制缺陷型腺病毒質(zhì)粒：將獲得的重組復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV/G+N與腺病毒骨架載體pAdEasy-1通過在大腸桿菌中質(zhì)粒間同源重組從而得到重組腺病毒質(zhì)粒；四、用重組腺病毒質(zhì)粒產(chǎn)生基因組結(jié)構(gòu)均一的重組腺病毒，包括以下操作：1)酶切，用Pac I酶切腺病毒質(zhì)粒，2)轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，3)接種293細(xì)胞，4)凍存，將基因組結(jié)構(gòu)均一的重組腺病毒凍存；將所述的重組腺病毒制成狂犬病活載體疫苗，直接注射動物進(jìn)行免疫。 |
| 摘要 | 一種利用腺病毒載體表達(dá)狂犬病病毒雙基因制備狂犬病活載體疫苗的方法，包括如下過程：一、制備目的基因：設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增出狂犬病病毒(rabies virus，RV)抗原蛋白G基因與N基因；二、構(gòu)建腺病毒穿梭載體：將抗原蛋白G基因與N基因插入到復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體特異性啟動子和終止子之間，構(gòu)建成含有融合基因(G+N)的腺病毒穿梭載體(pAdTrack-CMV/G+N)；三、獲得腺病毒質(zhì)粒：將獲得的重組復(fù)制缺陷型腺病毒穿梭載體(pAdTrack-CMV/G+N)與腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)通過同源重組得到重組腺病毒質(zhì)粒；四、用重組腺病毒質(zhì)粒產(chǎn)生基因組結(jié)構(gòu)均一的重組腺病毒，將重組腺病毒制成狂犬病活載體疫苗。本發(fā)明較之現(xiàn)有狂犬病疫苗更為安全和有效，制作周期較短。 |
| 國際公布 |
