| 公開(公告)號(hào) | CN1821423A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510028953.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.08.19 |
| 專利名稱 | 一種抗關(guān)節(jié)炎藥物細(xì)胞靶標(biāo)篩選系統(tǒng)及篩藥的方法 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 上海凱曼生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 龔邦強(qiáng);郭 雷;連霽虹;紀(jì) 偉 |
| 地址 | 200233上海市漕河涇高科技開發(fā)區(qū)田林路219號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海開祺知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 費(fèi)開逵;謝文凱 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種抗關(guān)節(jié)炎藥物的細(xì)胞靶標(biāo)篩選系統(tǒng)由如下步驟組成： a)將mPGES-1promoter、COX-1promoter和COX-2promoter的部分基因克隆進(jìn)pGL3BN載體Luciferase基因上游的克隆位點(diǎn)XhoI/HindIII、NheI/XhoI、XhoI/BglII之間重組載體pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter； b)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別轉(zhuǎn)染人A549細(xì)胞株； c)利用有限稀釋法篩選得到基因水平上穩(wěn)定表達(dá)的篩藥細(xì)胞靶標(biāo)M1、M2和M3； d)mPGES-1promoter的表達(dá)啟動(dòng)其下游Luciferase的表達(dá)。以Luciferase表達(dá)水平反映mPGES-1promoter表達(dá)程度。同理適用COX-1promoter及COX-2promoter組成共同的靶標(biāo)篩選系統(tǒng)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明建立了一種抗關(guān)節(jié)炎藥物的細(xì)胞靶標(biāo)篩選系統(tǒng)及篩藥的方法。本發(fā)明建立的細(xì)胞靶標(biāo)篩藥系統(tǒng)是運(yùn)用分子克隆技術(shù)，分別將mPGES-1 promoter、COX-1 promoter和COX-2promoter部分基因克隆進(jìn)人細(xì)胞株，獲得在基因水平上表達(dá)的篩藥細(xì)胞靶標(biāo)M1、M2和M3，進(jìn)而共同組成細(xì)胞靶標(biāo)篩藥系統(tǒng)。通過測(cè)定被篩選化合物抑制M1、M2和M3細(xì)胞luciferase表達(dá)的程度來篩選抗關(guān)節(jié)炎藥物。 |
| 國(guó)際公布 |
