| 公開(公告)號 | CN1824678A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.30 |
| 申請(專利)號 | CN200510016591.2 |
| 申請日期 | 2005.02.25 |
| 專利名稱 | 睪丸特異性蛋白50人源抗體的制備及用途 |
| 主分類號 | C07K16/18(2006.01)I |
| 分類號 | C07K16/18(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 李玉新;徐浩鵬;鮑永利 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 李玉新;鮑永利;徐浩鵬;劉 洋;魏景艷;李 惟;烏 垠;孟祥穎;張 靖;單繼東;易靜雯 |
| 地址 | 130021吉林省長春市人民大街5268號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 吉林長春新紀元專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 陳宏偉 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權(quán)項 | 一種人源抗體AI，其氨基酸序列包含免疫球蛋白重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，二者通過連接鏈連接，所說的人源抗體與人TSP50蛋白有較強的結(jié)合活性，其氨基酸序列為： MAEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWV50 SAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLREDTAVYYCARR100 QRLRHYANNWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGSALSSELTQDPAVSVALG150 QTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNNRPSGIPDRFSGSS200 SGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGFVFGGGTKLTVVLGAA245 其中氨基酸殘基77被P所替換的AI序列， 其中氨基酸殘基102-108(LRHYANN)被KSGRK所替換的AI序列， 其中氨基酸殘基99-108(RQRLRHYANN)被VRHRASRANL所替換的AI序列， 其中氨基酸殘基230被K或RV所替換的AI序列。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供一種睪丸特異性蛋白50人源單鏈抗體的制備方法，利用噬菌體抗體呈現(xiàn)技術(shù)，以人睪丸特異性蛋白50為靶抗原，通過免疫親和篩選法對重組噬菌體人抗體可變區(qū)基因文庫進行篩選。分離并克隆TSP50特異性單鏈抗體基因AI、AII和C8。繼而把單鏈抗體基因AI、AII和C8分別插入到含有組氨酸尾的原核表達載體PelB中，轉(zhuǎn)化Rosetta菌，通過IPTG誘導(dǎo)表達外源蛋白，將菌體裂解后用Ni-NTA柱親和層析，得到純化的單鏈抗體，ELISA鑒定其可以和TSP50全蛋白和50肽特異結(jié)合；并用基因工程的手段將此人源單鏈抗體大量表達。本發(fā)明還公開了睪丸特異性蛋白50人源單鏈抗體在女性乳腺癌等TSP50相關(guān)性疾病的診斷和治療用途。 |
| 國際公布 |
