| 公開(公告)號 | CN1824775A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.30 |
| 申請(專利)號 | CN200510016592.7 |
| 申請日期 | 2005.02.25 |
| 專利名稱 | 重組人血管抑素K1-3的制備工藝及其制品在腫瘤治療藥物中的應用 |
| 主分類號 | C12N15/12(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/12(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61K38/39(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 東北師范大學遺傳與細胞研究所 |
| 發(fā)明(設計)人 | 李玉新;烏 垠;鮑永利;王秀紅;孟祥穎;易靜雯;黃百渠;郝 水 |
| 地址 | 130021吉林省長春市人民大街5268號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 陳宏偉 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權項 | 一種制備重組人血管抑素K1-3的制備工藝，該工藝是由基因克隆、工程菌的誘導培養(yǎng)、重組產物的純化和復性過程組成，其步驟如下： (1)通過PCR方法從人肝細胞中克隆了人纖溶酶原cDNA中Kringle1-3的cDNA片段，在克隆時對其N-端和C-端序列進行了優(yōu)選。 (2)將這一cDNA片段克隆入自行設計構建的原核表達載體pHB中，用重組載體轉化大腸桿菌BL21(DE3)，經篩選得到高效表達重組人血管抑素的基因工程重組子。 (3)經發(fā)酵培養(yǎng)和誘導表達重組人血管抑素的菌體經超聲裂解、離心洗滌包含體后將其溶解，之后經過陰離子交換層析、調酸稀釋復性、陽離子交換層析、超濾濃縮及凝膠過濾等手段純化而得到人重組血管抑素蛋白質純品。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種人血管抑素K1-3的制備方法及其制品在抗腫瘤治療中的應用。本發(fā)明在對天然人血管抑素的生成機制、分子特性和生物學活性進行深入系統(tǒng)研究的基礎上，對重組人血管抑素的蛋白氨基酸序列進行了優(yōu)選，并自行設計構建了重組人血管抑素的原核高效表達系統(tǒng)，使血管抑素K1-3的表達量達到工程菌可溶性蛋白的50％以上，同時建立了最適的純化及復性工藝，使重組人血管抑素的純度達99.9％以上并能正確折疊。由此獲得的重組人血管抑素K1-3能抑制腫瘤新生血管的生成，并對多種腫瘤具有治療作用。 |
| 國際公布 |
