公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1824327A
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公開(kāi)(公告)日
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2006.08.30
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200510134964.6
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申請(qǐng)日期
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2005.12.27
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專利名稱
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導(dǎo)的核酸疫苗制備方法
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主分類號(hào)
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A61K48/00(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K48/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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余為一;仲大蓮;李槿年
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地址
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230036安徽省合肥市長(zhǎng)江西路130號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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合肥誠(chéng)興知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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宣圣義
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國(guó)省代碼
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安徽;34
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主權(quán)項(xiàng)
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導(dǎo)的核酸疫苗制備方法,其特征在于: (1)用含連接真核表達(dá)質(zhì)粒酶切位點(diǎn)和雞MHC恒定鏈基因片段起始區(qū)核苷酸序列的一對(duì)引物,經(jīng)PCR從雞脾細(xì)胞mRNA克隆雞恒定鏈基因片段5’端1至83核苷酸序列,作為引導(dǎo)片段,并經(jīng)過(guò)DNA序列測(cè)定鑒定: (2)用含雞MHC恒定鏈基因片段終止區(qū)、特定病原體保護(hù)性抗原或抗原表位基因片段起始區(qū)及終止區(qū)及真核表達(dá)質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)核苷酸序列的引物,經(jīng)過(guò)PCR從病原體mRNA克隆并獲得抗原或抗原表位基因片段; (3)用含連接真核表達(dá)質(zhì)粒酶切位點(diǎn)和抗原表位基因片段起始區(qū)核苷酸序列和病原保護(hù)性抗原或抗原表位基因片段終止區(qū)、真核表達(dá)質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)核苷酸序列的引物,經(jīng)過(guò)PCR從已制備的雞MHC恒定鏈基因片段和特定病原體抗原或抗原表位基因片段獲得融合基因片段; (4)應(yīng)用限制性內(nèi)切酶使雞MHCII恒定鏈基因片段的-5′端與保護(hù)性抗原融合基因片段的的-3′端成粘性末端,經(jīng)連接酶作用定向插入真核表達(dá)載體。
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摘要
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導(dǎo)的核酸疫苗制備方法屬疫苗制備技術(shù)領(lǐng)域。其所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:通過(guò)制備含編碼雞MHC恒定鏈和特定病原體保護(hù)性抗原表位核苷酸序列的核酸疫苗,提供一種既安全、又高效的新型疫苗型。其技術(shù)要點(diǎn)是:先制備雞MHC定鏈基因片段,再制備特定病原體保護(hù)性抗原或抗原表位基因片段;再制備含雞MHC恒定鏈與特定病原體保護(hù)性抗原或抗原表位的融合基因片段;最后將雞MHC恒定鏈與特定病原體保護(hù)性抗原融合基因片段定向插入真核表達(dá)載體,即得到本發(fā)明的核酸疫苗。與現(xiàn)有的疫苗相比較,本發(fā)明的核酸疫苗由于不存在病原返祖和變異的可能,所以安全可靠;且可提高免疫應(yīng)答效果。
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國(guó)際公布
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