| 公開(公告)號 | CN1273484C |
| 公開(公告)日 | 2006.09.06 |
| 申請(專利)號 | CN02125806.6 |
| 申請日期 | 2002.07.29 |
| 專利名稱 | 重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的純化方法 |
| 主分類號 | C07K14/435(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/435(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京北醫(yī)聯(lián)合生物工程公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 馬大龍;狄春輝;朱仁英;楊 璐;韓 普 |
| 地址 | 100083北京市海淀區(qū)學(xué)院路38號北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 黃 健 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的純化方法，其特征在于，將含有目的蛋白的樣品順序進(jìn)行陰離子交換液相層析和陽離子交換液相層析； 其中，陰離子交換液相層析過程的層析介質(zhì)為DEAEFastFlow； 使用的緩沖液包括：A液：pH8.550mMTris-HCl緩沖液 B液：pH6.820mMPB 樣品在A液中上樣，上樣完畢后，先以A液沖洗已載有目的蛋白的層析柱，然后采用B液進(jìn)行梯度洗脫，B液的洗脫梯度為0％-80％；當(dāng)B液梯度為80％時(shí)，收集洗脫峰； 陽離子交換液相層析過程的層析介質(zhì)為CMFastFlow； 使用的緩沖液包括：A液：pH5.550mMHAc-NaAc緩沖液 B液：2MNaCl 以陰離子交換液相層析過程的收集組份上樣，上樣完畢后，先以A液沖洗已載有目的蛋白的層析柱，然后采用B液進(jìn)行梯度洗脫，B液的洗脫梯度為0％-80％；當(dāng)B液梯度為10％時(shí)，收集洗脫峰。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種分離純化蛋白，尤其是重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的方法，采用二步液相層析法，首先進(jìn)行陰離子交換液相層析，然后再進(jìn)行陽離子交換層析。本發(fā)明利用簡單的方法替代繁瑣的傳統(tǒng)方法獲得了意想不到的效果，即，只使用簡單的二步液相層析法就得到了高純度，高活性的重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑，對于其它的蛋白質(zhì)純化工藝也提供了新的思路。 |
| 國際公布 |
