公開(公告)號
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CN1944462A
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公開(公告)日
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2007.04.11
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申請(專利)號
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CN200610104676.0
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申請日期
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2006.09.29
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專利名稱
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抗PV IgY抗體制備及其用于PV診斷試劑和預防藥物用途
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主分類號
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C07K16/02(2006.01)I
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分類號
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C07K16/02(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P31/18(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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西安交通大學
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發(fā)明(設計)人
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楊 軍;張明娟;陳曉黎;蘇寶山;王一理;司履生
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地址
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710049陜西省西安市咸寧路28號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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西安通大專利代理有限責任公司
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代理人
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李鄭建
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國省代碼
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陜西;61
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主權項
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一種抗PV IgY抗體的制備方法,其特征在于,具體包括下列步驟:(A)、PV抗原的制備: (a)選擇PV即乳頭瘤病毒感染所引起的乳頭狀瘤瘤體組織,通過物理、化學、生物方法進行破碎,分離PV病毒蛋白,并將上述一種或一種以上的相應PV病毒蛋白以任意比例混合,組成抗原混懸液; (b)上述PV病毒蛋白采用分子生物學方法通過常規(guī)的真核表達系統(tǒng)、原核表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、病毒表達系統(tǒng)即可獲得PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、E1或E2蛋白,并將上述一種或一種以上的相應PV病毒蛋白以任意比例混合,組成抗原混懸液; (c)上述PV病毒蛋白采用分子生物學方法制備可表達一種或一種以上PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、E1、E2蛋白的真核表達載體,并將上述一種或一種以上的真核表達載體以任意比例混合,組成混懸液,作為基因免疫疫苗,通過基因免疫的方式產(chǎn)生相應PV抗原; (B)、免疫方法: (a)初次免疫用弗氏完全佐劑乳化的A(a)或A(b)步驟制備的抗原混懸液在雌性禽類動物胸部上的4個點分布式肌內(nèi)注射注,2周后,用弗氏不完全佐劑乳化的A(a)或A(b)步驟制備的抗原混懸液進行第二次免疫,以后每隔30天左右加強免疫一次,免疫量同前;在初次免疫一周后,收集雌性禽類動物蛋,4℃下保存?zhèn)溆茫? (b)采用肌肉注射、基因槍的方法直接將A(c)步驟制備的可表達一種或一種以上PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、L1、L2蛋白及其基因的真核表達載體注入雌性禽類動物體內(nèi),免疫雌性禽類動物,2周后,進行第二次免疫;以后每隔30天左右加強免疫一次,免疫量同前,在初次免疫一周后,收集雌性禽類動物蛋,4℃下保存?zhèn)溆谩?
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摘要
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本發(fā)明公開了一種抗PV IgY抗體的制備及其該抗PV IgY在制備PV相關疾病免疫診斷試劑和預防藥物中的用途。抗PV IgY抗體是通過分子生物學方法獲得不同類型的PV病毒蛋白或能表達上述蛋白的真核表達載體,將其作為PV病毒蛋白抗原或基因疫苗免疫雌性禽類動物,通過常規(guī)方法分離并純化相應的抗PV IgY抗體,用于制備PV感染及相關疾病診斷試劑和預防藥物。實驗證明特異性抗PV IgY抗體具有特異性結合相應PV抗原的能力,可用于制備PV感染及相關疾病診斷試劑、分離和純化相應PV抗原,用于預防PV感染藥物的制備,并具有安全、副作用小、療效顯著等特點。
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國際公布
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