| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1304387C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2007.03.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510018540.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.04.13 |
| 專利名稱 | 冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)用對(duì)照品的分離制備工藝 |
| 主分類號(hào) | C07D311/02(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07D311/02(2006.01)I;G01N30/90(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院武漢植物園 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王有為;盧笑叢;龔復(fù)俊;崔慧芳;葛 建;陳 玲 |
| 地址 | 430074湖北省武漢市武昌區(qū)磨山 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 武漢開(kāi)元專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 朱盛華 |
| 國(guó)省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)用對(duì)照品的分離制備工藝，其特征在于按如下步驟進(jìn)行：A、含量大于90％的冬凌草甲素粗結(jié)晶用20～40倍甲醇在50℃～64℃下溶解，按重量比粗結(jié)晶∶柱層析硅膠＝1∶0.3～1∶0.5將粗結(jié)晶與200～300目柱層析硅膠拌混均勻，置于溫度低于50℃、通風(fēng)的環(huán)境中干燥，B、取重量是拌樣硅膠8～12倍的200目～300目新鮮硅膠裝柱，再將拌樣硅膠置于其上，用5～8倍柱中硅膠體積的石油醚洗滌前雜，再用4∶1～8∶3的石油醚、丙酮混合溶劑梯度解吸，C、收集富含冬凌草甲素的洗液，用薄層層析法展開(kāi)，以10％～50％硫酸乙醇顯色，到冬凌草甲素層析斑點(diǎn)顯色不明顯時(shí)停止解吸，解吸液在溫度為50℃、真空度0.6～0.8Mpa條件下濃縮，濃縮液出現(xiàn)渾濁時(shí)停止，D、濃縮液在-4℃～4℃靜置2到4h結(jié)晶，減壓抽濾，使冬凌草甲素晶體與母液分離，母液繼續(xù)減壓濃縮至出現(xiàn)渾濁，再靜置結(jié)晶，重復(fù)數(shù)次直至從母液中不再析出冬凌草甲素結(jié)晶，E、合并冬凌草甲素結(jié)晶，用10～15倍的丙酮、甲醇混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶精制，所獲結(jié)晶用高效液相色譜儀測(cè)定冬凌草甲素純度達(dá)到99.5％以上，即為冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品，丙酮、甲醇混合液二者的體積比為丙酮∶甲醇＝1∶8～1∶3。 |
| 摘要 | 冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)用對(duì)照品的分離制備工藝，涉及一種從冬凌草中制備冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品的方法。將粉碎的冬凌草進(jìn)行回流提取，提取液濃縮得稠膏狀提取物，脫脂后上硅膠柱層析，解吸，減壓濃縮，靜置結(jié)晶，得含量大于90％的冬凌草甲素粗結(jié)晶。粗結(jié)晶用甲醇溶解，上硅膠柱層析，用石油醚洗滌前雜，再以石油醚、丙酮混合溶劑進(jìn)行梯度解吸，合并富含冬凌草甲素組份的解吸液，濃縮結(jié)晶，減壓抽濾，使晶體與母液分離，母液繼續(xù)濃縮結(jié)晶，依此法重復(fù)操作多次，直至母液中再無(wú)結(jié)晶析出。合并結(jié)晶，以丙酮、甲醇混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶精制，得純度達(dá)99.5％以上的冬凌草甲素標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品。本發(fā)明所用溶劑量少，成本低廉，適于實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模制備。 |
| 國(guó)際公布 |
