何首烏—蒽醌類成分的測定方法—HPLC-UV

儀器設備  LC-10ATvp 高效液相色譜儀；SPD-10ATvp 紫外-可見檢測器， HW-2000色譜工作站。

色譜條件  色譜柱：DiamonsilC18 (250mm ×4.6mm，5μm)；流動相：甲醇-0.1%磷酸(85∶15)；流速：1.0 mL/mim，檢測波長：254nm；柱溫：室溫。

對照品溶液制備 　精密稱取大黃酸對照品、大黃素對照品、大黃酚對照品、大黃素甲醚對照品適量，加甲醇分別制成每1mL含大黃酸1. 600mg、大黃素1.680mg、大黃酚1.720 mg、大黃素甲醚1.600mg的溶液，作為對照品儲備液；分別精密量取上述對照品儲備液各1 mL，置10mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為對照品溶液Ⅰ；再分別精密量取上述對照品儲備液各1mL，置20mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為對照品溶液Ⅱ(每1mL中含大黃酸0.0800mg、大黃素0.0840mg、大黃酚0.0860mg、大黃素甲醚0.0800mg) 。

供試品溶液的制備  取本品粉末(過四號篩)10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50mL，稱定重量，水浴回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為測定游離蒽醌的供試品溶液； 再精密量取續(xù)濾液10mL，置錐形瓶中，水浴揮干，加2.5mol/L 硫酸20mL，超聲處理5min，加三氯甲烷20 mL，水浴回流1h，放冷，移至分液漏斗中，分取三氯甲烷液，酸水液用三氯甲烷提取3次，每次15mL，合并三氯甲烷液，水浴揮干，殘渣用適量甲醇溶解，移置10 mL量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為測定總蒽醌的供試品溶液。