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螺旋藻—β-胡蘿卜素的測(cè)定方法—HPLC

  
方法名稱:
  螺旋藻—β-胡蘿卜素的測(cè)定 — HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于螺旋藻中β-胡蘿卜素含量的測(cè)定
方法原理:
 本品加正己烷超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在435 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器    LC - 10AD高效液相色譜儀、SPD - 10A多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、CTO - 10A柱恒溫箱、C - R7Ae數(shù)據(jù)處理機(jī)(日本島津公司)

試劑    β - 胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品(德國(guó)E-Merck 公司)

    色譜條件    色譜柱:YMC - pack ODS(4.6 mm ×150 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇-乙腈-二氯甲烷(體積比為60∶30∶10);流速:1.0 mL/min;;檢測(cè)波長(zhǎng):435 nm;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:20 μL
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液制備    精密稱取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品4.6 mg,加入100 mL容量瓶中,用正己烷溶解并定容至刻度,作為標(biāo)準(zhǔn)母液,用時(shí)適當(dāng)稀釋。

供試品溶液制備    準(zhǔn)確稱取螺旋藻試樣0.2~0.3 g于25 mL容量瓶中。加入1.0 mL乙醇溶液濕潤(rùn)試樣,再加入20 mL正己烷溶液,塞緊磨口塞放入超聲波發(fā)生器中超聲振蕩25 min,然后用正己烷定容至刻度,靜止數(shù)分鐘,取1~2 mL用0.45 μm濾膜過(guò)濾,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取β一胡蘿卜素對(duì)照液以及螺旋藻供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算β一胡蘿卜素含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:m.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  趙厚民等. 螺旋藻中β-胡蘿卜素高效液相色譜測(cè)定方法的研究. 中國(guó)野生植物資源.2005,24(3):43~45
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