穿山龍－薯蕷皂苷元的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定穿山龍中薯蕷皂苷元的含量。

本方法適用于薯蕷科植物穿龍薯蕷Dioscorea nipponica Maki-no的干燥根莖。

本品加甲醇超聲處理，殘渣加3mol/L鹽酸溶液溶解并加熱水解，放冷，用三氯甲烷加熱回流兩次，合并濾液，殘渣加甲醇定容，搖勻，濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長203nm處檢測薯蕷皂苷元的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 3mol/L鹽酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按薯蕷皂苷元峰計算應不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 水＝84 16

2.2檢測波長：203nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過四號篩)0.5g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取薯蕷皂苷元對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過四號篩)約1g，精密稱定，置錐形瓶中，加入甲醇50mL，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，濾過，濾渣用甲醇20mL洗滌，合并甲醇液，回收甲醇蒸干，殘渣加3mol/L鹽酸溶液20mL（10mL，5mL，5mL)溶解，依次轉移至錐形瓶中，水浴中加熱水解30分鐘。取出，放冷，加入三氯甲烷30mL，加熱回流15分鐘，用三氯甲烷30mL，同法處理一次，濾過，再用三氯甲烷30mL洗滌容器及殘渣，合并三氯甲烷液，回收三氯甲烷至干，殘渣加甲醇溶解并轉移至25mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長203nm處測定薯蕷皂苷元（C₂₇H₄₂O₃)的峰面積，計算出其含量。