連翹提取物－連翹苷的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定連翹提取物中連翹苷的含量。

本方法適用于連翹經(jīng)加工制成的提取物。

本品加甲醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，續(xù)濾液蒸干，過柱，洗脫液濃縮至干，殘渣用50%甲醇溶解定容，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長277nm處檢測連翹苷的吸收值，計算出其含量。

1. 乙睛

2. 甲醇

3. 50%甲醇

4. 70%乙醇

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按連翹苷峰計算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙睛 水 ＝25 75

2.2檢測波長：277nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品1g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇15mL，稱定重量，浸漬過夜，超聲處理（功率100W，頻率40kHz)25分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，蒸至近干，加中性氧化鋁1.5g，拌勻，加置中性氧化鋁柱（100~200目，3g，內(nèi)徑1~1.5cm)上，用70%乙醇240 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用50%甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長277nm處測定連翹苷（C₂₉H₃₆O₁₅)的峰面積，計算出其含量。