清胃黃連丸—小檗堿、掌葉防己堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用反相高效液相色譜法測定清胃黃連丸中小檗堿、掌葉防己堿的含量。

本方法適用于中成藥清胃黃連丸。

供試品加甲醇進(jìn)行超聲提取，濾過，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測小檗堿、掌葉防己堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 乙腈 （色譜純)

3. 0.8％KH₂PO₄

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

YWG C₁₈柱 (150 × 4.6mm，5μm)

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 0.8％KH₂PO₄ ＝ 1 1

2.2 檢測波長：345nm

2.3 柱溫：28℃

1. 稱取供試品

精密稱取成藥粉末約1.0g，每個(gè)批號(hào)取5份。

2. 對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取小檗堿、掌葉防己堿對(duì)照品約10mL于100mL的容量瓶中，用甲醇定容，作為對(duì)照品溶液。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密吸取上述對(duì)照品液20、40、60、80、100、120μL，分別合并于5只2mL的量瓶中，用甲醇定容后，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置錐形瓶中，加甲醇15mL超聲提取20min后離心10min(3000r/min)，過濾。重復(fù)上述操作4次，合并濾液，甲醇定容至50mL，用0.4μm微孔濾膜過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL，進(jìn)入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定小檗堿、掌葉防己堿的吸收值，以峰面積積分值對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定小檗堿、掌葉防己堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

李嶸、羅蘭、王建春. RP－HPLC法測定清胃黃連丸中小檗堿、掌葉防己堿的含量. 海南醫(yī)學(xué)，1998，第4期：293-294.