麝香保心片-華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的測定-高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定麝香保心片中華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。

本方法適用于麝香保心片中華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量測定。

供試品研細(xì)，加甲醇回流提取，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長296nm處檢測華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的吸收值，計(jì)算出其含量。

1.乙腈（色譜醇)

2.二次重蒸水

3.磷酸二氫鉀

4.五氧化二磷

5.甲醇

6.磷酸

1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按華蟾酥毒基峰計(jì)算為5500，按脂蟾毒配基峰計(jì)算為5000。二者與其它峰的分離度大于1.50。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.5%磷酸二氫鉀溶液一乙腈（45：55，用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.2)

2.2 檢測波長：296nm

2.3 溫度：40℃。

3 索氏提取器

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取五氧化二磷減壓干燥24 h的華蟾酥毒基，脂蟾毒配基對(duì)照品各l0mg，分別置100m1量瓶中，加甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻；分別精密量取5m1，各置l0ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每1ml中含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50μg的對(duì)照品貯備溶液。

精密吸取2ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取麝香保心片10片，研細(xì)，混勻，取約0. 4g，精密稱定，加甲醇20m1，精密稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

對(duì)照品溶液與供試品溶液進(jìn)樣前用微孔濾膜(孔徑0.45μm)過濾。分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長296nm處測定華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的吸收值，計(jì)算出其含量。

世界科學(xué)技術(shù)-中藥現(xiàn)代化，HPLC法測定麝香保心片中華蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量，2002，4(3)，p64。