方法名稱： |
復(fù)方丹參滴丸—丹參素和原兒茶醛的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方丹參滴丸中丹參素和原兒茶醛的含量。 本方法適用于中藥制劑復(fù)方丹參滴丸。 |
方法原理： |
供試品加1%醋酸溶液進(jìn)行超聲，放冷，濾過，取續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處檢測丹參素和原兒茶醛的吸收值，計算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2. 醋酸 3. 對羥基苯甲酸 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 Nucleosil C18色譜柱（250×4.6mm，10μm)。 1.3 紫外吸收檢測器 2. 色譜條件 2.1 流動相：甲醇 水 冰醋酸 = 19 80 1 2.2 檢測波長：279nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品樣品0.125g。 2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密稱取對羥基苯甲酸10.0mg置于100mL量瓶中，加1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為內(nèi)標(biāo)溶液。 3. 對照品溶液的制備 精密稱取丹參素對照品20.0mg和原兒茶醛對照品4.0mg，置于200mL量瓶中，加1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為對照品儲備液。 4. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密量取上述對照品儲備液1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0mL置于10mL量瓶中，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1.0mL，用1%醋酸溶液稀釋至刻度，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。 5.供試品溶液的制備 將供試品置于25mL量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液2.5mL，加入1%醋酸溶液超聲處理使其溶解后，放至室溫并用1%醋酸溶液稀釋至刻度，樣品溶液用0.45μm濾膜過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處測定丹參素和原兒茶醛的吸收值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對供試品與內(nèi)標(biāo)峰的峰面積比值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長279nm處測定丹參素和原兒茶醛的吸收值，計算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
洪馨，宓穗卿，王寧生. 高效液相色譜法測定復(fù)方丹參滴丸中丹參素和原兒茶醛的含量. 中藥新藥與臨床藥理，2002，13（4)：247-249. |
