格列本脲片—格列本脲的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定格列本脲片中格列本脲的含量。

本方法適用格列本脲片。

供試品和內(nèi)標(biāo)均制成流動相溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處檢測格列本脲（C₂₃H₂₈ClN₃O₅S)和內(nèi)標(biāo)對羥基苯甲酸丁酯的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按格列本脲峰計算應(yīng)不低于 1000，格列本脲峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 磷酸二氫銨溶液=5 3

2.2 檢測波長：274nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于格列本脲20mg)。

2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取對羥基苯甲酸丁酯10mg，置100mL量瓶中，加甲醇6mL，超聲處理使溶解后，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

上述供試品置50mL量瓶中，加甲醇12mL，超聲處理使格列本脲溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25mL與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，至50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

4. 對照品溶液的制備

精密稱取格列本脲對照品適量，與供試品同法配制。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

精密量取上述供試品溶液及對照品溶液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處測定格列本脲及內(nèi)標(biāo)對羥基苯甲酸丁酯的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計算，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p595。