復(fù)方門冬維甘滴眼液—維生素B6、甲硫酸新斯的明、鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏、甘草

本方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方門冬維甘滴眼液中維生素B6、甲硫酸新斯的明、鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏、甘草酸二鉀和門冬氨酸的含量。

本方法適用于復(fù)方門冬維甘滴眼液。

供試品加水稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長260nm和220nm處檢測維生素B6、甲硫酸新斯的明、鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏吸收值，計算出其含量。

供試品加水稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測門冬氨酸和甘草酸二鉀的吸收值，計算出其含量。

1. 乙腈

2. 庚烷磺酸鈉溶液

3. 磷酸二氫鉀溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按維生素B6峰計算不應(yīng)低于5000，各個峰的分離度應(yīng)符合要求。

氨基硅烷鍵合硅膠為填充劑，門冬氨酸和甘草酸二鉀分離度應(yīng)符合要求。理論塔板數(shù)按門冬氨酸峰計算不應(yīng)低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相1：梯度洗脫，見下表

流動相2：磷酸二氫鉀溶液 乙腈=58 42

2.2 檢測波長1： 260nm ，10分鐘后改為220nm

檢測波長2：220nm

2.3 柱溫：室溫

2.4 流速：1 mL/min

1. 庚烷磺酸鈉溶液

取庚烷磺酸鈉4.04g與磷酸二氫鉀2.72g溶于1000mL水中，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0。

2. 磷酸二氫鉀溶液

取磷酸二氫鉀5.44g，用水溶解并稀釋至1000mL。

3. 稱取供試品

精密量取本品10mL。

精密量取本品2mL。

4. 對照品溶液的制備

1號對照品，精密稱取維生素B6、甲硫酸新斯的明、鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏、甘草酸二鉀對照品適量，加水流動相分別制成每1mL含0.2、0.02、0.012、0.04與0.4 mg的溶液。

2號對照品，精密稱取甘草酸二鉀與門冬氨酸對照品各適量，加水流動相分別制成每1mL含1.56和0.2 mg的溶液。

5. 供試品溶液的制備

將1號供試品置25mL量瓶中，加水稀釋至刻度，作為1號供試品溶液。

將2號供試品置10mL量瓶中，用水稀釋至刻度，作為2號供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述1號對照品溶液與1號供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm和260nm處測定維生素B6、甲硫酸新斯的明、鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏、甘草酸二鉀的吸收值，計算出其含量。

分別精密吸取上述2號對照品溶液與2號供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定門冬氨酸和甘草酸二鉀的吸收值，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.419。