炔諾孕酮炔雌醚片—炔諾孕酮和炔雌醚的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定炔諾孕酮炔雌醚片中炔諾孕酮和炔雌醚的含量。

本方法適用炔諾孕酮炔雌醚片。

供試品加流動相溶解，經(jīng)超聲提取，加內(nèi)標溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，記錄色譜圖，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測炔諾孕酮（C₂₁H₂₈O₂)、炔雌醚（C₂₅H₃₂O₂)和內(nèi)標醋酸甲地孕酮的吸收值，計算出其含量。

1.乙腈

2.水

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按炔諾孕酮峰計算應(yīng)不低于 3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈＋水 = 80＋20

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

5.1 稱取供試品

精密稱取本品20片，研細，精密稱取適量（約相當于炔諾孕酮12mg)。

5.2 對照品溶液的制備

精密稱取炔諾孕酮，炔雌醚適量，加流動相溶解并稀釋成溶液。

5.3 內(nèi)標溶液的制備

取己酸孕酮適量，加乙腈制成每1mL中約含有0.12mg的溶液，搖勻，即得。

5.3 供試品溶液的制備

將上述供試品置于50mL量瓶中，加流動相溶解，超聲使溶解，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標溶液1mL，混合均勻，取20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定炔諾孕酮和內(nèi)標醋酸甲地孕酮的吸收值，按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。另取炔諾孕酮和炔雌醚對照品溶液，同法測定。