隨著電子技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)、激光技術(shù)、電子計算機(jī)技術(shù)和新熒光化學(xué)物質(zhì)等多種高科技術(shù)在臨床檢驗(yàn)工作的應(yīng)用，血細(xì)胞分析儀在自動化程度、先進(jìn)功能和完美設(shè)計方面已經(jīng)提高到一個新的階段。BC－5500型五分類血液細(xì)胞分析儀是深圳邁端生物醫(yī)療電子股份有限公司近年來推出的較新產(chǎn)品，并在臨床檢驗(yàn)市場中得到了較好的推廣使用。本文以血細(xì)胞分析流程為線索對其工作原理展開論述，為廣大臨床工程師及血細(xì)胞分析檢驗(yàn)人員提高設(shè)備使用效率和保養(yǎng)質(zhì)量，有效延長設(shè)備使用壽命提供理論上的參考。
1、吸取樣本根據(jù)配置的不同，本分析儀提供三種進(jìn)樣方式。分別為：開放進(jìn)樣方式、封閉進(jìn)樣方式、自動進(jìn)樣方式。其中。開放進(jìn)樣方式支持全血和預(yù)稀釋模式，封閉進(jìn)樣和自動進(jìn)樣方式支持全血模式。在自動或封閉進(jìn)樣方式下，分析儀將吸取180μl的全血樣本。在開放進(jìn)樣的全血工作模式下，分析儀將吸取120μl的全血樣本。在開放進(jìn)樣的預(yù)稀釋工作模式下，操作者應(yīng)先將40μl的末梢血樣本和120μl的稀釋液在機(jī)外混合，形成稀釋比為1:4的稀釋樣本，然后再將此稀釋樣本送至分析儀進(jìn)行采樣，分析儀將吸入120μl的稀釋樣本。
2、稀釋樣本待測樣本采集到分血閥后，根據(jù)檢測的需要快速準(zhǔn)確地被分為四份。然后，在并行的四個稀釋流程中經(jīng)過不同的試劑作用，分別形成用于紅細(xì)胞/血小板測量、血紅蛋白測量、白細(xì)胞分類測量和白細(xì)胞計數(shù)測量的檢測樣本。
2.1 全血模式的樣本稀釋流程
2.1.1 紅細(xì)胞/血小板稀釋
全血樣本8.3μl－→加稀釋液2.992ml變成1:361的樣本－→取60μl再加稀釋液2.94ml得稀釋比為1：：18050的待檢測樣本。
2.1.2 血紅蛋白稀釋
全血樣本6μl－→加入稀釋液1.994ml和M－50LH溶血劑1.0ml變成1:500檢測樣本。
2.1.3 白細(xì)胞分類稀釋
全血樣本20μl－→加M－50LEO（Ⅰ)溶血劑1.02ml再加M－50LEO（Ⅱ)溶血劑0.32ml以稀釋成1:68的白細(xì)胞檢測樣本。
2.1.4 白細(xì)胞計數(shù)稀釋
全血樣本20μl－→加M－50LBA溶血劑1.02ml稀釋為1:52的白細(xì)胞檢測樣本。
2.2 預(yù)稀釋模式下的樣本稀釋流程
2.2.1 紅細(xì)胞/血小板稀釋
40μl末梢血樣本－→加稀釋液120μl變成1:4的樣本－→取其8.3μl加 2.992ml稀釋液為1:1444的樣本－→取此樣本60μl加2.94ml的稀釋液得1:72200的待測樣本。
2.2.2 血細(xì)蛋白稀釋
40μl末梢血樣本－→加稀釋液120μl變成1:4的樣本－→取6μl先加稀釋液1.994ml，再加M－50LH溶血劑約1.0ml得到1:2000的待測樣本。
2.2.3 白細(xì)胞分類稀釋
40μl末梢血樣本－→加稀釋液120μl變成1:4的樣本－→取其20μl加M－50LEO（Ⅰ)溶血劑1.02ml，再加M－50LEO（Ⅱ)溶血劑得到1:272的待測樣本。
2.2.4 白細(xì)胞計數(shù)稀釋
40μl末梢血樣本－→加稀釋液120μl變成1:4的樣本－→取其20μl加M－50LBA溶血劑1.02ml，得到1:208的待測樣本。
3、白細(xì)胞測量本機(jī)采用激光流式細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行參數(shù)取樣，得到血細(xì)胞大小及細(xì)胞內(nèi)部信息的二維分布圖（即散點(diǎn)圖)，進(jìn)而經(jīng)過滿足特定運(yùn)算關(guān)系的邏輯電路處理，在電腦顯示終端輸出WBC、Bas#、Bas%、Lym%、Neu%、Mon%、Eos%、Lyn#、Mon#、Eos#、Neu#等測量結(jié)果。
4、血紅蛋白濃度測量待測樣本進(jìn)入比色池中，在比色池的一端讓LED光管發(fā)出波長為525nm的單色光照射血紅蛋白復(fù)合物溶液。在另一端通過光電管接收透射光，轉(zhuǎn)換為電壓信號，并與醫(yī).學(xué)全在線m.gydjdsj.org.cn比色池中加入樣本之前的相應(yīng)信號比較，經(jīng)過滿足
HGB（單位為g/L)＝常數(shù)×Ln（ )特定運(yùn)算關(guān)系的DSP邏輯電路處理后將分析結(jié)果顯示在“計數(shù)”界面。
5、紅細(xì)胞/血小板測量
本分析儀利用電阻抗法對紅細(xì)胞/血小板進(jìn)行計數(shù)。(如下圖所示)，小孔兩側(cè)有一對正負(fù)電極，連接電流為Ⅰ的恒流電源。由于細(xì)胞具有不良導(dǎo)體的特性，其穿過小孔瞬間使兩電極間電阻r(t)立即增大，電極間電壓u(t)隨之增大。
u(t)＝Ir(t)
u(t)函數(shù)脈沖及其脈沖幅度就能再現(xiàn)出穿過小孔細(xì)胞的數(shù)量和體積，u(t)信息經(jīng)相應(yīng)邏輯運(yùn)算處理的DSP電路即可得出在設(shè)備終端顯示的RBC、MCV、HCT、MCH、MCHC、RDW－CV、RDW－SD、PLT、MPV、PDW、PCT等技術(shù)參數(shù)。
6、小結(jié)BC－5500五分類血液細(xì)胞分析儀采用電阻抗法檢測紅細(xì)胞和血小板的數(shù)目以及體積分布，采用比色法測量血紅蛋白濃度，采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)獲得白細(xì)胞總數(shù)和五類白細(xì)胞的分類統(tǒng)計計數(shù)。經(jīng)過吸取樣本－→稀釋樣本－→測量樣本－→結(jié)果顯示－→液路沖洗的工作流程提供23項(xiàng)血液參數(shù)以及4項(xiàng)研究參數(shù)的血量分析結(jié)果，并提供2個直方圖和2個散點(diǎn)圖。
