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其它鏈擴(kuò)增技術(shù)及應(yīng)用范圍

 

  五、PCR-SSCP分析技術(shù)

  近幾年來,在PCR基礎(chǔ)上完善和發(fā)展起來的多種基因變異檢測方法是基因分析和檢測的一次技術(shù)革命。其中日本學(xué)者創(chuàng)建的PCR-SSCP(Single-Strand Conformation Polymorphism anal-ysis of PCR products)格外重要。它是指單鏈DNA分子在變性PAGE中電泳遷移率隨其構(gòu)象的改變而改變的性質(zhì)。單鏈DNA分子的構(gòu)象改變即可由DNA多態(tài)性引起,又可由基因突變引起。為此,有的學(xué)者試圖用PCR-SSGE(Single-Strand Gel Electrophoresis of PCR products)代替原命名。

  PCR-SSCP分析包括PCR擴(kuò)增和單鏈產(chǎn)物電泳兩個(gè)階段。對于分析小于400bp的PCR產(chǎn)物十分有效,對于大于400bp的PCR產(chǎn)物需處理后再分析,必須注意的是PCR-SSCP分析不能確定基因變異部位和內(nèi)容,泳動(dòng)后必須進(jìn)一步完成DNA測序。

  六、結(jié)語

  PCR技術(shù)以驚人的速度在研究與診斷領(lǐng)域得到應(yīng)用,限于篇幅所限,在此不一一進(jìn)行討論了。本章 重點(diǎn)討論了PCR技術(shù)發(fā)展的有關(guān)內(nèi)容,尤為影響PCR的主要因素和PCR的各種反應(yīng)模式及新進(jìn)展,以求大家在實(shí)際工作中能夠注意到這些問題,并有所創(chuàng)新,相信由于PCR自身高敏感性及實(shí)用性,在分子生物學(xué)研究與醫(yī)學(xué)實(shí)踐中PCR技術(shù)將越來越受到人們的重視。無論從哪一個(gè)角度,PCR技術(shù)從分子水平對許多傳染病、遺傳性疾病和腫瘤進(jìn)行診斷,使法醫(yī)鑒定、生物進(jìn)化的研究更為簡便和強(qiáng)化,在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程與醫(yī)學(xué)研究中都占有重要的地位。

  PCR技術(shù)是以生物體內(nèi)DNA復(fù)制為基礎(chǔ)理論的,這一技術(shù)把基礎(chǔ)理論與應(yīng)用有機(jī)結(jié)合起來,給我們以辯證的思考。對于其它學(xué)科中有關(guān)理論與實(shí)踐結(jié)合的問題具有指導(dǎo)意義。PCR技術(shù)必將為我們提供大量有關(guān)核酸的知識(shí),豐富我們的理論,改變我們以前的認(rèn)識(shí),推動(dòng)學(xué)科的向前發(fā)展。

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