�。ㄈ�)乙型肝炎肝細(xì)胞內(nèi)病毒抗原的定位及分布
近年來，對(duì)乙型肝炎病毒（HBV)分子生物學(xué)研究表明，HBV基因組有四個(gè)開放讀框（Open reading frame, ORF)，其中S基因區(qū)能編碼HBV外殼的結(jié)構(gòu)蛋白，即小S蛋白（主蛋白，HBsAg)，中等S蛋白（前S2抗原)和大S蛋白（前S1抗原)，它們都具有較高的免疫原性。P區(qū)編碼具有反轉(zhuǎn)錄酶活性的病毒DNA多聚酶。X區(qū)編碼145至154個(gè)氨基酸的多肽，編碼蛋白為HBxAg。C區(qū)編碼HBV的核心部分，即HBcAg 和HBeAg。目前通過免疫組化及免疫電鏡等技術(shù)均可觀察到HBV各種抗原在肝細(xì)胞定位及分布狀態(tài)。
1．HBsAg pre –S1,pre-S2在肝細(xì)胞內(nèi)的分布HBsAg ，前S1和前S2抗原在乙型肝炎，特別是慢性活動(dòng)性肝炎的肝細(xì)胞內(nèi)檢出率為52～65%。HBsAg ，前S1和前S2抗原陽性經(jīng)常出現(xiàn)于同一部位，甚至同一細(xì)胞內(nèi)。前S1陽性反應(yīng)比HBsAg和前S2強(qiáng)。有的病例三者并非同時(shí)出現(xiàn)，并非在同一位置。少數(shù)情況下，HBsAg 陽性，而前S1和前S2陰性，反之，HBsAg 陰性，而前S1和S2陽性；絕大多數(shù)情況下前S1和前S2并存在同一部位或同一細(xì)胞之內(nèi)，少數(shù)情況下，HBsAg ，前S1陽性而前S2弱陽性或陰性。HBsAg、前S1和前S2抗原主要位于乙肝的肝細(xì)胞漿內(nèi)，部分位于胞膜上，少數(shù)位于胞核內(nèi)。HBsAg ，前S1和前S2抗原陽性物質(zhì)在肝細(xì)胞內(nèi)的分布大致有三種形態(tài)：①包涵體型：陽性物質(zhì)聚集成團(tuán)塊狀，輪廓清楚，呈圓形或卵圓形，位于核的一側(cè)，或者只占據(jù)胞漿的小部分，或占據(jù)胞漿的大部分，將核推向一側(cè)，此型最為多見；②全胞漿型或彌漫型：陽性物質(zhì)均勻分布于肝細(xì)胞的胞漿內(nèi)，核往往為陰性位于中央，此型亦較常見；③胞膜型或周邊型：陽性物質(zhì)沿著胞膜或胞膜內(nèi)側(cè)分布，有人把胞膜型再分為胞膜抗原I型和II型，前者主要表現(xiàn)為S抗原聚集在肝竇側(cè)的肝細(xì)胞膜上，呈線條狀排列；后者主要累及整個(gè)肝細(xì)胞膜，呈顆粒狀或串珠排列。上述S抗原在肝細(xì)胞內(nèi)分布的三種類型往往是兩者或三者聯(lián)合出現(xiàn)，只是以某一種為主而已，單獨(dú)存在者少見。S抗原陽性細(xì)胞的分布有三種類型：1)散在型，在切片中只見少數(shù)散在的陽性細(xì)胞，此型多見于慢性遷延性肝炎或靜止期肝硬變組織內(nèi)；2)局灶型，陽性細(xì)胞呈簇分布于切片的某一區(qū)域，此型多見于急性輕型肝炎或慢性活動(dòng)性肝炎的組織內(nèi)；3)彌漫型，多數(shù)陽性細(xì)胞彌漫分布于切片內(nèi)，此型多見于慢性活動(dòng)性肝炎，急性重型肝炎或肝硬變的整個(gè)結(jié)節(jié) 內(nèi)。不同病例S抗原反應(yīng)強(qiáng)度及陽性細(xì)胞檢出率是不同的，就是同一病例不同部位也不盡相同。S抗原陽性物質(zhì)反應(yīng)的強(qiáng)弱取決于S抗原的含量。
2．HBcAg 和HBeAg在肝細(xì)胞內(nèi)分布HBcAg多見于乙型肝炎、肝硬變的肝細(xì)胞內(nèi)，特別是腎臟移植病人，有內(nèi)HBcAg檢出率特別高。一般來說，在慢性肝炎HBcAg的檢出率在10%～30%不等，其檢出率明顯低于HBsAg。這可能是由于HBcAg和抗-HBc在核內(nèi)形成免疫復(fù)合物，HBcAg被封閉之故。HBcAg多位于肝細(xì)胞的胞核內(nèi)，少數(shù)位于胞漿內(nèi)及胞膜上。HBcAg陽性物質(zhì)位于核內(nèi)常呈細(xì)顆粒狀均勻分布，少數(shù)為斑點(diǎn)狀或網(wǎng)狀；而在胞漿內(nèi)則為細(xì)顆粒狀或絮狀；在胞膜上則為均勻細(xì)顆粒狀。經(jīng)常出現(xiàn)的是以核型、漿型和膜型同時(shí)存在于一個(gè)肝細(xì)胞內(nèi)，亦可單獨(dú)存在。HBcAg陽性肝細(xì)胞的分布和HBsAg相似，亦分散在型、局灶型和彌漫型。局灶型經(jīng)常見于慢性活動(dòng)性肝炎；彌漫型經(jīng)常見于腎移植的肝；散在型經(jīng)常見于急性肝炎或遷延性肝炎。HBeAg陽性物質(zhì)在肝細(xì)胞內(nèi)的分布狀態(tài)與HBcAg相似。HBeAg 和HBcAg經(jīng)常位于同一細(xì)胞核內(nèi)，用羅達(dá)明標(biāo)記雙染色證明HBcAg和HBeAg之間有密切關(guān)系。HBeAg陽性主要見于HBsAg陽性的慢性活動(dòng)性肝炎的肝細(xì)胞內(nèi)。
3．HBxAg在肝細(xì)胞內(nèi)分布HBxAg經(jīng)常見于慢性肝炎的肝細(xì)胞內(nèi)，其檢出率為65%左右，比HBcAg和HBsAg高。特別在慢性活動(dòng)性肝炎檢出率更高，約73%；而慢性遷延性肝炎則為43%左右。HBxAg陽性物質(zhì)為均勻細(xì)顆粒狀，主要位于肝細(xì)胞的胞漿內(nèi)，少數(shù)位于胞核內(nèi)及胞膜上。不同病例HBxAg陽性物質(zhì)的分布及陽性反應(yīng)強(qiáng)度不同，就是同一病例不同部位其結(jié)果亦不盡相同。HBxAg陽性肝細(xì)胞的分布狀態(tài)和HBsAg相似，亦呈散在型，局灶型和彌漫型。在慢性活動(dòng)性肝炎以局灶型多見，其次為彌漫型。有些病例，HBxAg陽性細(xì)胞圍繞小血管分布，有的則沿著纖維隔分布。HBxAg陽性物質(zhì)亦見于少數(shù)肝內(nèi)膽管上皮內(nèi)及kupffer細(xì)胞內(nèi)。
4．IgG(抗-HBc)在肝細(xì)胞內(nèi)分布用免疫熒光及免疫酶技術(shù)證實(shí)在肝炎組織中存在Igg ，這種IgG 可能就是抗-HBc，該抗體經(jīng)常和HBcAg以復(fù)合物的形式存在于肝細(xì)胞核內(nèi)，少數(shù)也見于胞漿內(nèi)及胞膜上。Rey（1979)還證明這些IgG只見于含有HBcAg 的肝細(xì)胞核內(nèi)。IgG(抗-HBc)陽性物質(zhì)的分布及其陽性細(xì)胞的分布同HBcAg。
